凝血因子Ⅷ与中国人血友病甲研究进展_Advance_in_Study_on_Coagulation_Factor_Ⅷ_and_Hemophilia.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing)21(2):41一461999 综 生拉 凝血因子皿与中国人血友病甲研究进展 刘建湘 王鸿利 陈 竺 上（海第二医科大学附属瑞金医院上海血液学研究所，上海200025) AdvanceinStudyonCoagulationFactor现andHemophiliaAinChina LIUJian-Xiang WANGHong-LiCHENZhu (ShanghaiInstituuteofHematology,RuijinHospital,ShanghaiSecondMedicalUniversity,Shanghai200025) 血友病甲为最常见的遗传性出血性疾病，是由于血浆凝血因子恤 (F物）缺陷所致。F皿基因位于X染色 体，所以患者绝大多数为男性，女性杂合子为携带者，而女性患者极少见． 重型患者自幼即有反复自发性出血，不经治疗者往往造成关节畸形和致残。严重者可因颅内出血死亡。目前 仍以替代疗法为主川。随着FVll[基因的克隆和基因突变检测技术的发展，血友病甲的直接基因诊断和遗传咨询 等方面已经取得突破性进展．基因治疗的实验研究也正开展得如火如茶。我国近年不仅对血友病甲进行了大规模 的流行病学调查，也从分子水平进行了多方面的研究。 1FVll[基因及突变 通过原位杂交和体细胞杂交分析，FV11基因被定位于Xg28,1984年被克隆2〔)．基因全长186kb，包括26 个外显子，转录成9010bp的cDNA，含150bp的5’非翻译区 U（TR),57bp编码N-端19个氨基酸的信号 肤、6996bp的蛋白质编码区及 1806bp的3端UTR.编码区只占基因总长的5%，其余 177kb为内含子序列， 长度从207bp至34.2kb不等．在56和 1241号密码子存在多态性．目前对F恤基因的转录调控序列了解不 多 1〔〕。 在FV19基因内含子22中另有 2个基因F8A和F8B，这是首次在哺乳动物发现的基因内基因．在这2个基因 之间有一具有双向转录活性的CpG岛。F8A转录方向与F恤相反，F8B转录方向与F恤相同。在X染色体远端 距F8A约500kb处另有 2个F8A的同源基因。F8A可与2个同源基因之一发生同源重组，使F现基因从外显 子1一22倒位至X染色体长臂远端，而外显子23-26仍处于原位。分裂的两部分不能被剪接到一起，导致重型 血友病甲碍〔〕。 国外已对白种人血友病甲基因突变进行了大规模检测，并建立了世界范围的因子恤基因突变数据库(5.6)． 除内含子 22倒位约占重型病例的一半外，目前共检测到不同突变431种，其中单碱基置换导致的点突变261种 (61%)，缺失突变 147种 3（4%)+插人突变23种 5（%)．无义突变均导致重型，而引起轻中型表现的点突变 都是错义突变。约5％患者FVfl[抗原相对高于其功能活性(F（VIQ:C)，称为交叉反应物阳性 C（RM十）。这些病例对 研究F姗蛋白质结构与功能的关系有非常重要的价值。如凝血酶切割位点Arg372和Arg1689的点突变可导致 CRM十。Tyr1680的突变影响与vWF的结合，使FVIQ稳定性下降．点突变产生新的糖基化位点也可影响FVM的 活性，去掉糖基后活性可恢复正常。CRM一或降低的患者，其突变可能影响蛋白质的折叠而使其稳定性下降。有 些患者有相同的点突变，但临床表现却不一样，其原因不明，可能与不同的遗传背景或其他基因位点有关．有少 数点突变影响mRNA前体的剪接，包括绝对剪接保守序列GT/AG的突变、延伸保守序列突变及突变产生新 的剪接位点等 3〔.5,6)。 42 遗 传HEREDITAS(Beijing)1999 21卷 F呱基因缺失绝大多数为重型，大小从lbp--l00kb不等．没有发现明显的缺失突变热点．缺失突变 尤（其 是大片段缺失）易诱发FVIQ抑制物产生。抽入突变较少见，多为在同一碱基重复出现处插人，与滑动错配(s（lip- pedmispairing）模型相符 ，〔〕． 最近根据铜蓝蛋白的三维结构构建了因子恤A区的模拟分子结构模型ca)．根据这一模型可预测A区错义 突变对结构和功能的影响9〔,10)．如果进一步全面阐明因子恤的立体结构，则将对分析基因突变与蛋白质结构和 功能的关系以及血友病甲的治