《出口番茄制品中乙烯利残留量的检测+液相色谱-串联质谱法》编制说明2.docVIP

《出口番茄制品中乙烯利残留量的检测 液相色谱-串联质谱法》编制说明 一、任务来源 本检验方法标准的制定工作，是按照国家认证认可监督管理委员会文件《》下达的任务而进行的，项目编号为2012B386，项目名称为《》，由出入境检验检疫局Phenomenex（美国）公司承担研究起草。 化学名称为2-氯乙基磷酸，为C2H6CIO3P?16672-87-0。是高效植物生长调节剂，一分子乙烯利可以释放出一分子乙烯，具有促进果实成熟、调节性别转化等效应。使用乙烯利催熟既能提高早期产量，又能改善果实品质，已成为番茄、香蕉、苹果等生产过程中普遍使用的促生长调节剂。但是已有报道滥用乙烯利也会带来危害，过量的残留会使人出现恶心，呕吐，胆碱酯酶活性降低，甚至昏迷；对环境、水体可造成污染等等。因此，欧美国家已明确规定，水果产品不得在采收前施以各种生长催熟剂。各国对番茄中乙烯利的限量规定：CAC、日本、美国和我国为2 mg/kg，欧盟为lmg/kg；各国对苹果中乙烯利的限量规定：CAC、美国和日本为2 mg/kg，欧盟为0.6 mg/kg；对香蕉的限量规定：欧盟为0.05mg/kg，日本为2mg/kg。 图1 乙烯利结构式 317条，年加工能力超过200万吨，番茄制品出口量全国第一，年出口创汇7.4亿美元。新疆产番茄酱以高番茄红素、低农残污染而享誉全球，是新疆农业经济的支柱产业。目前常用的番茄酱中乙烯利的检测方法是顶空气相色谱法，样品中残留的乙烯利和氢氧化钾反应，生成乙烯，采用顶空进样，气相色谱氢火焰离子化检测器检测。该方法简单、较灵敏，应用广泛，但该法实际检测的是乙烯，而成熟果实中天然释放乙烯，内源性乙烯被当成乙烯利检出，会带来一定的假阳性结果。目前测定乙烯利的检测标准有：SN 0705-1997《出口肉及肉制品中乙烯利残留量检验方法》及农业部行业标准 NY/T1016-2006《水果蔬菜乙烯利残留量的测定气相色谱法》，前者仅适用于肉制品，后者适用于水果蔬菜，两者均为气相色谱法，但方法需要重氮甲烷化，操作复杂，毒性大，SN 0705-1997已着手进行修订。现行的标准均没有关于果蔬及其制品中乙烯利残留量的快速、准确的检测方法。因此，制定本标准具有较高的创新性和现实意义。 三、国内外研究现状和技术路线的选择 经文献检索，目前测定乙烯利的检测方法有气相色谱法(GC) [1-4]、固相微萃取-气相色谱法( HS-SPME-GC) [5]、气相色谱-质谱法( GC-MS) [6-7]、离子色谱法( IC) [8]、离子色谱-等离子体发射光谱-质谱法(IC-ICP-MS) [9]、液相色谱-串联质谱法 (HPLC-MS/MS) [10-11]。SN 0705-1997及NY/T1016-2006标准方法需要重氮甲烷化，操作复杂，毒性大。顶空-气相色谱法存在假阳性结果，HPLC-MS/MS灵敏度高，选择性和特异性好，抗干扰能力强，能够对低浓度的样品进行很好的定性确认，是目前较为先进和常用的残留检测方法。近两年立项的SN标准均没有关于果蔬中乙烯利测定的标准。 本标准拟采用液相色谱串联质谱法对番茄制品中乙烯利残留量进行测定。选择最佳的提取溶和净化方法LC-MS/MS仪器方法，使方法测定低限达到0.05 mg/kg，满足各国残留限量的要求，且方法回收率、精密度等技术指标满足SN/T 0001-1995和《残留分析质量控制指南》的要求。 四、编制依据 本标准是按照GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则》和GB/T 20001.4-2001《标准编写规则 第4部分：化学分析方法》及SN/T 0001-1995《出口商品中农药、兽药残留量及生物毒素检验方法标准编写的基本规定》的要求进行编写制订的。 五、主要研究内容 1、样品的说明： 新疆出口番茄制品主要有三类：一是整番茄罐头、番茄丁罐头、番茄沙司及番茄汁，其基质与番茄相近，可溶性固形物含量约为5%；二是番茄酱，其为浓缩了4～～～～～75℃以～ 3.5时水溶液中稳定，随pH升高水解释放出乙烯，75以下稳定采用酸0 ，体积比）提取番茄乙烯利测定Strata-X-AW,60mg/3mL），回收率接近100%。但番茄酱加标样品用PH=6的水提取后同样过该弱阴离子交换柱，尝试各种洗脱溶剂都不能将乙烯利洗脱下来！后将小柱规格换为200mg/6mL，依然无回收。还尝试了丙酮提取后上样，结果也不理想。 随后比较了Waters 氨基柱（500mg/3mL）及菲罗门 Strata NH2（500mg/3mL）两种不同品牌的氨基柱的净化效果。同样条件菲罗门的净化效果高出Waters数倍。 实验室接着对氨基柱的上样量、淋洗条件（适当增加淋洗液回收率有较明显增加）以及洗脱条件进行了优化，洗脱曲线见图2。在比较了三种