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金樱子多糖的提取、纯化及其降血脂作用的研究 摘 要 近年的大量研究表明，生物体内的多糖具有调节机体免疫、抗肿瘤、抗氧 化、降血糖和降血脂等广泛的生理作用。中药金樱子（Rosa laevigata Michx ）， 又名糖罐子，是蔷薇科蔷薇属的一种野生常绿蔓性灌木的果实。在医学上金樱 子有着广泛的应用，早在《本草纲目》中就记载有多种功效。金樱子在我国分 布广泛、资源丰富，其多糖含量较高，在金樱子的诸多作用中，多糖无疑是其 中的主要活性成份之一。因此，开展对金樱子多糖（Rosa laevigata michx polysaccharides ，RPs ）的分离纯化及其药理作用的研究有着广泛的应用前景。 本研究采用正交实验设计，以温度、料液比、提取时间等为变量，预测最 佳工艺参数，优化金樱子多糖的最佳提取条件；粗提物经 Sevage 法脱蛋白， 透析法除去小分子，乙醇沉淀，冷冻干燥，得到金樱子多糖粉末；重新水溶解 后，采用 DEAE-纤维素柱分离纯化，得到三个组份的多糖，经凝胶过滤色谱 法，测定其分子量分布范围。 利用 RPs 为受试物，进行体外自由基的清除实验，再利用实验性高脂血 症小鼠和大鼠模型，观察 RPs 及其各组分的降血脂作用。以高脂饲料持续喂 小鼠 2W ，大鼠 14W 后，采血，直接测定血清的总胆固醇（TC ）、甘油三酯（TG ）， 高密度脂蛋白（HDL-C ）含量，并由公式计算低密度脂蛋白（LDL-C ）和动脉 硬化指数（AI ）值；采用冰冻切片，光镜观察大鼠动脉的形态学结构的变化。 研究结果如下： 1．浸提温度、料液比和浸提时间对金樱子多糖的提取率有较显著的影响， 粗提最佳温度、料液比及提取时间分别为：95℃、1:10、4h 。 2 ．金樱子多糖经纯化分离后，所得三个组份 RP1、RP2 和 RP3 的平均分 子量分别为： 8300～8600、18500～19000 和 11000～12500。 3 ．三种多糖组份对超氧阴离子自由基，羟基自由基都有显著的清除作用， 但活性强度不同。在对 O2－·的清除作用中，RP2 的活性最强（EC50=642.7ug/ml ）， 而 RPs 对·OH 清除率最高（EC50=1455.1ug/ml ）。在降血脂实验中，饲喂 RP2 小鼠组具有显著的降血脂活性，与高脂模型组比较，血清中的 TC、TG 、LDL-C 含量和 AI 均有显著降低（P0.01 ），HDL-C 含量则显著升高（P0.01 ）。在进 一步的大鼠实验中，血管的组织形态学对比表明：RP2 饲喂组与高脂饮食组相 比，动脉粥样硬化病变明显减轻（P0.05 ）。 综上所述，金樱子多糖 RP2 有较显著降脂效果，对动脉粥样硬化可能有一 定的预防作用,值得进一步深入研究和开发利用。 关键词：金樱子；多糖 RP2 ；纯化；降脂作用 Studies on the Separation and Lipid-depressing Function of Polysaccharides in the Rosa laevigata michx Abstract It has been fully recognized in recent studies that the polysaccharides have various effects such as anti-tumor, anti-virus, anti-mutation, anti-oxidation, immune modulation, reduction of blood sugar and blood lipids and so on. Rosa laevigata michx, a wild evergreen trailing shrub, belongs to rose family in rose genera and dispersed all over China, rich in natural re