人肺腺癌Anip973CDDP耐药细胞系建立及生物学特性分析.docVIP

人肺腺癌 Anip973/CDDP 耐药细胞系的建立及生物学特性分析 中文摘要 专业提供学术期、学位论文下载、外文文献检索下载服务 购买地址:测 方法 本研究应用人肺腺癌细胞系 Anip973 采用顺铂逐步增加剂量法 诱 导建立人肺腺癌耐药细胞模型 Anip973/CDDP 细胞计数法绘制生长曲线 计算 其倍增时间  光学显微镜和扫描电镜观察其形态  流式细胞仪分析其细胞周期 MTT 法测定细胞 IC50  计算其耐药指数 结果  本研究经过 24 个月建立了人肺腺癌耐药细胞系 Anip973/CDDP  通 过 Anip973/CDDP 生 物 学 特 性 分 析 发 现  (1) 光 镜 及 电 子 显 微 镜 观 察 Anip973/CDDP 细胞与 Anip973 细胞比较细胞形态不规则 呈长伪足的多角形及 体积增大  胞质内细胞器比较发达  线粒体丰富  (2) 与 亲 代 细 胞 相 比 Anip973/CDDP 细胞生长曲线的倍增时间无明显差异 (3)细胞周期分析发现 耐 药细胞系 Anip973/CDDP 的 G0-G1 期细胞明显减少 为 52.18  S 期细胞明显增 多  为 28.60%  而亲代细胞系 Anip973 的上述各周期的百分比分别为 66.11%和 16.37  (p0.05)  两种细胞系 G2-M 期细胞无明显变化  提示耐药细胞的 DNA 合成增加  经 MTT 法测定 Anip973/CDDP 细胞比较亲代细胞的 CDDP 半数致 死浓度  IC50  增大至 27.26 倍  该耐药细胞系同时对伊立替康  吉西他滨  达 卡巴嗪 足叶乙甙 诺维本 表阿霉素药物也产生了交叉耐药 耐药倍数分别为 20.33  19.96  7.10  5.34  5.27  4.38  而对异环磷酰胺  氟尿嘧啶相对敏感 耐药倍数分别为 1.25  1.09  均 P 0.05 结论  Ainp973/CDDP 是可靠的人肺腺癌耐药细胞系  它的建立为进一步探 讨顺铂致人 NSCLC MDR 的发生机制奠定了基础 关键词  肺腺癌  Anip973/CDDP 细胞系  顺铂  多药耐药 2 哈尔滨医科大学硕士学位论文 Establishment of a Human Lung Adenocarcinoma Drug-resistance Cell Line Anip973/CDDP and analysis of its biological properties Abstract Objective To establish a human lung adenocarcinoma multidrug-resistant cell line Anip973/CDDP and to study its biologic characteristics. Methods The human lung adenocarcinoma multidrug-resistant cell line (A973/CDDP) was established by inducing human lung adenocarcinoma cell line Anip973 with step-wise increasing concentrations of cisplatin, which used to be the first-line chemotherapeutic drug for lung cacer. The cell growth curve and the doubling time were determined by counting. Changes in cellular morphology and ultrastructure were observed under inverted-microscope and scanning electron microscope respectively. The cell cycles were determined by flow cytometry. The chemosensitivities of Anip973/CDDP and Anip973 to cisplatin, irinotecan, gemcitabine, dacarbazine, etoposide, navelbine, pharmorubicin, isofosfamide and 5-fluorouracil wer