中国对虾（Penaeus+chinensis)酚氧化酶生物化学性质及几种免疫促进剂对中国对虾酚氧化酶和血细胞影响.pdf

!璺翌墅苎竺重竺堕塑竺塑竺兰堡垦墨些苎墨堡堡兰型塾堕墅墅蔓竺堕塑塾塑堕竺墅堕 本文所用缩写词 BGBP：p-1，3-glucan—bindingprotein，p一葡聚糖结合蛋白 DETC：Diethy’ldithiocarbamate，二乙基二硫氨基甲酸酯 sulfoxide，二甲基亚砜 DMSO：dimethyl acid，乙二胺四乙酸 EDTA：thylenediaminetetraacetic kDa：kilodalton，千道尔顿 LBP：lipopolysaccharide—bindingprotein，脂多糖结合蛋白 LBTI：limabean inhibitor，利马豆胰蛋白酶抑制剂 trypsin LPS：lipopolysaccharide，脂多糖 OD280：280rffn absorbance，280nnl光吸收 methane fluoride p-APMSF．-p-Amidinophenylsulfonyl hydrochloride，脒苯基甲 烷磺酰氟盐酸 fluoride，苯甲基磺酰氟 sulforyl PMSF：phenylmethane PO：phenoloxidase，酚氧化酶 PPAE：prophenoloxidase—activatingenzyme，酚氧化酶原激活酶 proPO：prophenoloxidase，酚氧化酶原 inhibitor，大豆胰蛋白酶抑制剂 trypsin SBTI：soybean SDS—PAGE：sodiumsulfate dodecyl gel polyaerylemideelectrophoresis，聚丙烯酰 胺凝胶电泳 ketone，甲苯磺酰赖氨酰氯甲酮 TLCK：N．tosyl—L—lysylchoromethyl ketone，甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲酮 chloromethyl TPCK．．N-tosyl—L—phenylalanyl 2 !曼塑堂奎兰里主竺窒圭兰些笙兰—— ——————————————————————————————p———_————————————一一一 中国对虾俨P，2口P淞c办加g瑚西)酚氧化酶的生物化学性质 及几种免疫促进剂对中国对虾酚氧化酶和血细胞的影响 摘要 chinensis)酚氧化酶是中国对虾非特异性免疫系统中的 中国对虾(Pen(1eus 主要成员，在对虾免疫防御中起着关键性作用。对酚氧化酶的研究，对于弄清 酚氧化酶的精确生物化学性质，进而确定其在对虾免疫防御中的生物学功能及 其作用机制具有重要意义。本文以中国对虾(Penaeuschinensis)的血淋巴为材 为87．5kDa左右，在实验操作过程中极易发生降解或自身降解，变成有活性的 大小约77kDa的酚氧化酶，1％SDS可使该酶原全部被激活而成为有活性的酚 氧化酶。以三．二羟苯丙氨酸∞．DOPA)为特异性底物对酚氧化酶活性进行研究发 用多种氧化酶抑制剂对酚氧化酶纯化样品的酶活性进行研究，发现抗坏血酸 (ascorbic 具有很强的抑制作用，硫脲(thiourea)对酚氧化酶活性也具有较强的抑制作用， 而酚氧化酶对苯甲酸(benzoicacid)、柠檬酸(citric acid)和亚硫酸钠(sodium