食品卫生检测技术第06章.ppt

食品添加剂的测定 a. 正丁醇-无水乙醇-氨水（1％）（6+2+3） 供纸色谱用。 　 b. 正丁醇-吡啶-氨水（1％）（6+4+3） 供纸色谱用。 　c. 甲乙酮-丙酮-水（7+3+3） 供纸色谱用。 　d. 甲醇-乙二胺-氨水（10+3+2） 供薄层色谱用。 　 e. 甲醇-氨水-乙醇（5+1+10） 供薄层色谱用。 　f. 柠檬酸钠溶液（25g/L）-氨水-乙醇（8+1+2） 供薄层色谱用。 　 合成着色剂标准溶液 按第一法[（2）P.]方法，分别配制着色剂的标准溶液浓度为每毫升相当于1.0mg。 　 着色剂标准使用液 临用时吸取色素标准溶液各5.0mL，分别置于50mL容量瓶中，加pH6的水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于0.10mg着色剂。 食品添加剂的测定 3.仪器 （1）可见分光光度计 （2）微量注射器或血色素吸管 （3）展开槽（25cm×6cm×4cm） （4）层析缸 （5）滤纸 中速滤纸，纸色谱用。 （6）薄层板（5cm×20cm） （7）电吹风机 （8）水泵 食品添加剂的测定 4.分析步骤 　 （1）样品处理 　　①果味水、果子露、汽水 称取50.08样品于100mL烧杯中。汽水需加热驱除二氧化碳。 　　②配制酒 称取100.0g样品于100mL烧杯中，加碎瓷片数块，加热驱除乙醇。 　 ③硬糖、蜜饯类、淀粉软糖 称取5.00g或10.0g粉碎的样品，加30mL水，温热溶解，若样液pH较高，用柠檬酸溶液（200g/L）调至pH4左右。 　 ④奶糖。称取10.0g粉碎均匀的样品，加30mL乙醇-氨溶液溶解，置水浴上浓缩至约20mL，立即用硫酸溶液（1+10）调至微酸性再加1.0mL硫酸（1+10），加lmL钨酸钠溶液（100g/L），使蛋白质沉淀，过滤，用少量水洗涤，收集滤液。 食品添加剂的测定 ⑤蛋糕类 称取10.0g粉碎均匀的样品，加海沙少许，混匀，用热风吹干用品（用手摸已干燥即可以），加入30mL石油醚搅拌。放置片刻，倾出石油醚，如此重复处理三次，以除去脂肪，吹干后研细，全部倒入G3垂融漏斗或普通漏斗中，用乙醇-氨溶液提取色素，直至着色剂全部提完，以下按[4.（1）④]自“置水浴上浓缩至约20mL”起依法操作。 食品添加剂的测定 （2）吸附分离 将处理后所得的溶液加热至70℃，加入0.5～1.0g聚酰胺粉充分搅拌，用柠檬酸溶液（200g/L）调pH至4，使着色剂完全被吸附，如溶液还有颜色，可以再加一些聚酰胺粉。将吸附着色剂的聚酰胺全部转入G3垂融漏斗中过滤（如用G3垂融漏斗过滤可以用水泵慢慢地抽滤）。用pH 4的70℃水反复洗涤，每次20mL，边洗边搅拌。若含有天然着色剂，再用甲醇-甲酸溶液洗涤1～3次，每次20mL，至洗液无色为止。再用70℃水多次洗涤至流出的溶液为中性。洗涤过程中必须充分搅拌。然后用乙醇-氨溶液分次解吸全部着色剂，收集全部解吸液，于水浴上驱氨。如果为单色，则用水准确稀释至50mL，用分光光度法进行测定。如果为多种着色剂混合液，则进行纸色谱或薄层色谱法分离后测定，即将上述溶液置水浴上浓缩至2mL后移入5mL容量瓶中，用乙醇（50％）洗涤容器，洗液并入容量瓶中并稀释至刻度。 食品添加剂的测定 （3）定性 　 ①纸色谱 取色谱用纸，在距底边2cm的起始线上分别点3～10μL样品溶液、1～2μL着色剂标准溶液，挂于分别盛有[（2）P.a.、（2）P.b.]的展开剂的层析缸中，用上行法展开，待溶剂前沿展至15cm处，将滤纸取出于空气中晾干，与标准斑比较定性。也可取0.5mL样液，在起始线上从左到右点成条状，纸的左边点着色剂标准溶液，依法展开，晾干后先定性后再供定量用。靛蓝在碱性条件下易褪色，可用[（2）P.c.]展开剂。 食品添加剂的测定 ②薄层色谱 　a.薄层板的制备 称取1.6g聚酰胺粉、0.4g可溶性淀粉及2g硅胶G，置于合适的研钵中，加15mL水研匀后，立即置涂布器中铺成厚度为0.3mm的板。在室温晾干后，于80℃干燥1h，置干燥器中备用。 　 b.点样 离板底边2cm处将0.5mL样液从左到右点成与底边平行的条状，板的左边点2μL色素标准溶液。 　 c.展开 苋菜红与胭脂红用[（2）P.d.]展开剂，靛蓝与亮蓝用[（2）P.e.]展开剂，柠檬黄与其它着色剂用[（2）P.f.]展开剂。取适量展开剂倒入展开槽中，将薄层板放入展开，待着色剂明显分开后取出，晾干，与标准斑比较，如Rf值相同即为同一色素。 食品添加剂的测定 （4）定量 　 ①样品测定 将纸色谱的条状色斑剪下，用少量热水洗涤数次，洗液移入10mL比色管中，并加水稀释至刻度，作比色测定用。 　 将薄层色谱的条状色斑包括有扩散的部