马铃薯蚜虫在番茄上的生物学特性测定.docVIP

马铃薯蚜虫在番茄上的生物学特性测定 所有的昆虫生物测定都在4-5周的番茄植物上进行，除非特别说明，否则，它们的测定都在生长箱(23oC, 16-h/8-h light/dark 光周期)中完成。通过4种类型的生物测定检测蚜虫的不同生物学特性表现。 第一种类型，非罩笼种群生长测定用于比较蚜虫对野生型、spr2、 jai1-1和acx1基因型植株的侵染能力。 每株植物上接15头蚜虫，不用罩笼，蚜虫能在同一植株的叶片间移动，或者从植株上逃逸。接虫后5天记录每个植株上蚜虫总数，这反映出寄主植物对蚜虫寄主接受、存活和繁殖的真实作用。 第一种类型，夹笼用于测定短期蚜虫种群生长对MeJA处理、FAD7基因反义链抑制、spr2、NahG、spr2和NahG联合，以及NPR1基因VIGS干扰等植株反应的差异。 固定数量(每笼4-5头蚜虫)的初成成蚜通过夹笼饲养在单个叶片上(每株3-4笼)(每一测定的准确数量见图中说明)，接虫后6天评价蚜虫的繁殖与存活。单笼(二级重复)值平均得到每个重复植株的单一数据点。这个生测设计用于在没有寄主选择情况下蚜虫种群生长的比较。 第三个种类型，单头成蚜在野生型和spr2植株上的寿命和每天产蚜量监测。 刚出现的无翅成蚜(24 h以内形成的成蚜)被接种到夹笼中(每笼1头蚜虫，每株设2个笼)，每隔24 h检查成蚜的存活，记录成蚜所产下的幼蚜，并将幼蚜移出夹笼。由于这个测定需要的空间较大，所以植株生长在温室中(21oC–27oC, 16-h/8-h light/dark photoperiod)，这个测定监测14天，直到spr2基因型植株上的所有蚜虫死亡为止。平均蚜虫寿命(存活天数)、幼蚜生产以及每天繁殖力(每个存活天数的幼蚜生产总量)进行单因子ANOVA方差分析。此外，通过回归分析来评估蚜虫每天存活率和繁殖力。 第四种类型，比较蚜虫对野生型和spr2基因型寄主的偏好。 在未受伤野生型和spr2型植株的成对嫩叶之间的泡沫塑料选择台上，放置10头初成无翅成蚜进行偏好选择测定。嫩叶通过光滑相纸做成的15 cm圆形隔板放在嫩叶柄基部，与植株其他部分隔离，隔板上涂抹一层Tanglefoot，阻止昆虫 (如图)。蚜虫通常在释放的短时间内就从选择台上爬行到嫩叶上，随后，要么停留在嫩叶上开始繁殖，要么通过选择台转移到其他嫩叶上。释放蚜虫1 h、4 h和24 h后，记录每片嫩叶或停留在选择台上的蚜虫数量，并通过成对T测验分析数据。在植物之间的塑料平台上或爬下塑料台当没有定植在嫩叶上的蚜虫不在数据分析之列。 Avila, C. A., Arévalo-Soliz, L. M., Jia, L., Navarre, D. A., Chen, Z., Howe, G. A., Meng, Q.-W., Smith, J. E. and Goggin, F. L. 2012. Loss of Function of FATTY ACID DESATURASE7 in Tomato Enhances Basal Aphid Resistance in a Salicylate-Dependent Manner. Plant Physiology 158: 2028–2041.