高效液相色谱￣质谱用于天然产物活性成分的筛选.pdfVIP

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2017-09-12 发布于重庆
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高效液相色谱￣质谱用于天然产物活性成分的筛选.pdf

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２０１３年７月Ｖｏｌ.３１Ｎｏ.７Ｊｕｌｙ２０１３ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ６４０~６４５庆祝欧庆瑜先生八十华诞专栏研究论文ＤＯＩ:１０.３７２４/ ＳＰ.Ｊ.１１２３.２０１３.０３０１３毛细管电泳结合高效液相色谱￣质谱用于天然产物活性成分的筛选张艳梅ꎬ　康经武∗ (中国科学院上海有机化学研究所ꎬ上海２０００３２) 摘要:发展了毛细管电泳(ＣＥ)和高效液相色谱￣质谱(ＨＰＬＣ￣ＭＳ)相结合的用于天然产物中活性成分筛选和鉴定的方法ꎮ 该方法中ꎬ用ＨＰＬＣ半制备柱对天然产物粗提物进行分离纯化ꎬ再用ＣＥ对ＨＰＬＣ纯化后的组分进行活性测试ꎮ 根据ＨＰＬＣ￣ＭＳ/ ＭＳ提供的二级质谱数据ꎬ即可确定活性成分的化学结构ꎮ 以乙酰胆碱酯酶为实验模型ꎬ对我们发展的筛选方法进行了验证ꎮ 从黄连粗提物中确定了药根碱、巴马汀等７种活性成分ꎬ并通过ＣＥ测定了它们的半抑制率(ＩＣ )值ꎮ 与传统的天然产物分离纯化和活性筛选方法相比ꎬ该方法具有简单、微量、快速、准确的优点ꎮ ５０本文建立的方法为天然产物粗提物中活性成分的筛选提供了新技术ꎮ 关键词:毛细管电泳ꎻ高效液相色谱￣质谱ꎻ活性成分ꎻ天然产物ꎻ药物筛选中图分类号:Ｏ６５８　　　文献标识码:Ａ　　　文章编号:１０００￣８７１３(２０１３)０７￣０６４０￣０６Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｔｈｅａｃｔｉｖｅｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓｉｎｎａｔｕｒａｌｐｒｏｄｕｃｔｓｂｙｃａｐｉｌｌａｒｙｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓａｎｄｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ￣ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙＺＨＡＮＧＹａｎｍｅｉꎬＫＡＮＧＪｉｎｇｗｕ∗ (ＳｈａｎｇｈａｉＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＯｒｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒｙꎬＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＳｈａｎｇｈａｉ２０００３２ꎬＣｈｉｎａ) Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ａｎｅｗｓｔｒａｔｅｇｙｆｏｒｓｃｒｅｅｎｉｎｇｔｈｅｃｒｕｄｅｎａｔｕｒａｌｅｘｔｒａｃｔｓａｎｄｑｕｉｃｋｌｙｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇｔｈｅｂｉｏａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗａｓｄｅｖｅｌｏｐｅｄ. Ｉｎｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｗｉｔｈｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇ￣ｒａｐｈｙ￣ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ (ＨＰＬＣ￣ＭＳ)ꎬｔｈｅｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓꎬｓｕｃｈａｓｔｈｅｅｎｚｙｍｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓꎬｉｎｔｈｅｃｒｕｄｅｎａｔｕｒａｌｅｘｔｒａｃｔｃａｎｂｅｑｕｉｃｋｌｙｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙｃａｐｉｌｌａｒｙｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ (ＣＥ)￣ｂａｓｅｄａｃｔｉｖｉｔｙａｓｓａｙ. ＴｈｅｃｒｕｄｅｎａｔｕｒａｌｅｘｔｒａｃｔｓｗｅｒｅａｓｓａｙｅｄｂｙａＣＥ￣ｂａｓｅｄｅｎｚｙｍｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｃｒｅｅｎｉｎｇｍｅｔｈｏｄꎬａｎｄｔｈｅａｃｔｉｖｅｅｘｔｒａｃｔｗａｓｉｓｏｌａｔｅｄｂｙＨＰＬＣ￣ＭＳ/ ＭＳｗｉｔｈａｓｅｍｉ￣ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅｃｏｌｕｍｎ. Ｔｈｅｎꎬｅａｃｈｅｌｕｔｅｄｃｏｍｐｏｎｅｎｔｗａｓａｓｓａｙｅｄａｇａｉｎｗｉｔ