366例疑似乙型肝炎患者HBV-DNA检测与乙肝5项指标结果分析.pdfVIP

维普资讯 大理学院学报 第6卷 增刊 2007年6月 J0URNg1．OF队 UUNIVERSrTY Vo1．6 SupplementJun．2007 366例疑似乙型肝炎患者HBV—DNA检测与 乙肝5项指标结果分析 杨艳秋 (大理学院德宏教学医院，云南潞西 678400) [摘要]目的：探讨HBV—DNA与乙肝5项指标检测之间的相关性。方法：采用荧光定量聚合酶链反应(FQ- PCR)$,I定HBVDNA，并同时运用酶联免疫吸附(EUSA)法测定乙肝5项指标分析二者相关性 。结果：小三阳 纽HBV—DNA~／n性检出率及拷贝数均低于大三阳纽，有显著性差异(尸O．01)，各组比较结果表明，大三阳组患 者血清HBV—DNA检出率最高，达91．92％，平均拷贝数为6．83~1067fl~贝／ml。结论：乙肝5项指标全部阴性及仅 HBsAb阳性者仍有HBV—DNA栓出阳性病例，因此在检测中应联合应用两种方法进行检测，以提高检 出率，避 免漏诊，为临床HBV感染、复制及传染性的判断以及指导治疗提供更为可靠的判定依据。 [关键词]荧光定量聚合酶链反应；酶联免疫吸附试验；乙型肝炎病毒 [中图分类号]R373 [文献标识码]B [文章编号]1672—2345(2007)Sl一0276—03 乙型肝炎是世界上最常见的传染病之一 ，世界 剂盒由中山医科大学达安基因诊断中心提供，采用 卫生组织 (WHO)估计，本病每年造成i00万人死亡 中国杭州博 日生物有限公司生产的Line— Gene型 (¨。 慢性 乙型肝炎是HBV感染的一种严重后果。 实时荧光定量PCR仪检测。 HBV—DNA是直接反映乙肝病毒存在、活动性复制 l_3 检测方法 ELISA检测方法按照说明书规范操 及具有传染性的可靠指标 j。但 目前我国HBV感染 作，经酶标仪判断实验结果。HBV— DNA检测方法； 者多以其血清乙肝5项指标判定，由于其组合模式 待测样本经FQ—PCR碱裂解法提取DNA，将定量的 复杂多样，从而导致了临床上对部分发病患者的 DNA提取液放入反应管中于Linr Gene型荧光定 HBV感染复制状况难 以判断，有时甚至会出现漏诊 量PCR仪扩增后 ，由电脑 自动分析计算出定量结果。 的情况。定量PCR法的应用，使得我们在进行HBV— HBV检测的引物探针序列如下 ：F：5-ATCCTGCT— DNA检测的同时得以定量分析，有利于临床HBV感 GCTATGCCTCATCTr-3 ：R：5-ACAGTGGGGGAAA 染的诊断、治疗方案的选择及疗效判断。本文采用 GCCCTACGAA 一3 ；PROBE：5 一TGGCTAGqTIAC- 荧光定量PCR(FQ— PCR)对366例疑似乙肝患者标 TAGTGCCA，I] C一3 。 本血清的不同HBV血清学标志物组合进行了HBV— 2 结果 DNA检测 ，并对结果进行了统计学处理，以探讨 FQ— PCR检~]IHBVDNA和ELISA法检测乙肝5 HBV—M与HBV—DNA复制水平的相关性。 项指标结果见下表。 1 资料与方法 从表中可看出HBsAgHBeAgHBsAb(大三阳) 1．1 标本来源 均系2006年1月至12月到我院就诊 组99例病人中有91(91．92％)例HBV—DNA阳性，其 的366例疑似乙肝患者的血液标本。 中有8例HBV—DNA阴性，可能是基因变异或受干扰 1．2 ELISA试剂与仪器 ELISA法试剂盒为厦门英 素治疗影响；HBsAgHBeAbHBcAb(小三阳)组157 科新创科技有限公司产品，酶标仪为郑州安图生物 例病人 中有40(25．48％)例HBV—DNA阳性 ；H