15份虾脊兰属植物的遗传多样性研究.pdfVIP

西南大学学报 自然科学版 年 月 第 卷第 期. .. 文章编号: ?? ? 份虾脊兰属植物的遗传多样性研究 黄宝华 , 钟凤林 , 刘添锋。, 陆銮梅 .漳州职业技术学院,福建漳州; .福建农林大学 园艺学院,福州; .龙岩市农业科学研究所,福建 龙岩 ; .漳州师范学院,福建 漳州 摘要:为探讨虾脊兰属植物的遗传多样性,从 个随机 引物中筛选出 个多态性较好的引物对份虾 脊兰野生种进行了分析,结果表明: 个 引物共扩增出条带,其中多态性带条,多态性比率为.; 份虾脊兰野生种间的遗传相似系数的变幅从 . 到 . ,平均值为 . ,表明虾脊兰属植 物的遗传多态性较丰富.按 法对供试材料进行聚类分析,将 份虾脊兰野生种分为三大类,这与其所生 长的地理环境及海拔高度有较好的一致型. 关 键 词:虾脊兰属; 标记;遗传多样性 中图分类号: .. 文献标志码: 虾脊兰属 植物隶属于兰科,大部分为地生种,少数为附生兰 ,是兰科中一个十分受人喜 爱的属.虾脊兰属野生种具体有多少种,各植物志记载不一.到 年 月,英国皇家园艺协会登录的虾 脊兰植物种及品种已经有个 。亚洲热带、亚热带地区广泛分布着虾脊兰属植物,大洋洲、非洲以及 中美洲也有分布.我国为虾脊兰属植物次生分布区,有 种, 变种 .虾脊兰属植物叶片较大、花色丰 富、姿态优美,具有较高的观赏价值,可做盆栽、切花、园林地被植物等 .其中很多种也是很好的药用 植物,如虾脊兰 . 、剑叶虾脊兰 . 、三褶虾脊兰 . 等的假鳞茎和根部具有清热 解毒、散於止痛的功效,主治胃溃疡、慢性肝炎、慢性咽炎、关节痛、跌打损伤等 ,虾脊兰 . 和 .中含有靛玉红、靛红等药物成分,能促进皮肤血液循环 . 在国外,日本、韩国及泰国等地已选育出多个自然杂交和栽培的虾脊兰种类,作为商品花卉已形成一 定规模 .在国内还属野生待开发花卉,福建省也有一些野生种类的分布,主要分布在海拔~ , 花期有 ~ 月的春花类型,也有 月的秋花类型,该属植物于 年被列为待驯化开发利用的资源之 一 . 国内对虾脊兰属植物的应用基本依赖于野生资源,这样难免对它的资源及环境造成破坏,而且很多 种和变种之间仅靠外观特征很难鉴别.因此,对虾脊兰属植物的研究、保护、开发利用势在必行. 兰花的研究与分类鉴定已深入到分子水平,特别是分子标记技术的应用,已广泛用于兰科植物 遗传多样性分析、系统与分类学研究、品种鉴定等方面 . 技术 是分子标记技术中的一种,具有样品用量少、操作简单、特异性强、灵敏度高和效率高等优 点,在遗传多样性评价、种质鉴定、亲缘关系的演化及分类等领域得到广泛应用,此外,在遗传图谱的构 建、辅助选择育种等方面也有大量的研究 引,但以虾脊兰属植物为材料的研究还未见报道.本研究以课题 组保存的 份虾脊兰属种质为材料,运用 分析技术进行分子标记研究,探讨这些种质间的遗传多 一 ?收稿日期: 基金项目: 福建省科技重大专项;福建省科技创新平台建设项目基金资助 作者简介: 黄宝华 一 ,女,福建漳浦人,硕士,讲师,主要从事植物栽培与遗传多样性研究. 通信作者: 陆銮梅,教授级高级农艺师.第 期 黄宝华,等: 份虾脊兰属植物的遗传多样性研究样性和种间的亲缘关系,以期为应用 技术在虾脊兰属植物分类鉴定方面的研究及现有虾脊兰野生种 的保护和利用提供理论依据,同时为虾脊兰属植物的相关研究提供参考. 材料和方法 . 材 料 试验所用材料全部为野生种 表 ,于种至福建漳州龙海一苗圃, 年 月开始取样. 表 虾脊兰属植物引种地区和引种时间 . 方 法 . . 总的提取 取植株嫩叶,采用改良的 法提取基因组,用 . 琼脂糖凝胶电泳检测其质量,并 用紫外分光光度计检测其浓度,最后每个样品稀释到 / ,放 ℃冰箱里储存备用. . . 反应体系 仪使用 公司的.扩增程序为: ℃预变性; ℃℃ , ℃, 个循环; ℃ , ℃.反应体系为:总体积,模板 .约 、 × , .. / 、 酶 . .、引物 .. / , 。 补至.扩增产物在 / 恒压条件下,于 . 琼脂糖凝胶 含 . / / 溴化乙锭 中电泳 .在 凝胶成像系统下观察并照相,记录多态性片段. . . 引物的筛选 引物由上海生物工程技术服务有限公司合成,共条进行筛选.引物多态性带选择标准以 模板扩增片段至少在 个种出现,且其它种至少有 个不出现.选择扩增谱带清晰、多态性好的引物 用于样品扩增. ’ . . 数据处理 根据电泳清晰可重复的条带,迁移率相同的条带记为 个位点,扩增阳性 有条带 记为“ ”,扩增阴性 无条带、弱带 记为“ ”,数据录人 ,建立原始表征数据矩阵,计算多态性位点百分率: :×% 是为多态位点