不同培养基上繁殖的昆虫病原线虫格氏线虫表皮蛋白的差异.pdfVIP

昆 虫 学 报ActaEntomologicaSinica，December2011，54(12)：1348—1353 ISSN0454-6296 不同培养基上繁殖的昆虫病原线虫格氏 线虫表皮蛋白的差异 刘 华，姚 庆，袁京京，曾洪梅 ，邱德文 (中国农业科学院植物保护研究所，农业部作物有害生物综合治理重点实验室，北京 100081) 摘要：表皮蛋白(surfacecoatproteins，SCPs)是格氏线虫Steinernemaglaseri克服寄主免疫系统的关键因素，能够抑 制昆虫免疫反应，促进线虫的侵染。为了进一步研究表皮蛋白抑制昆虫免疫的作用机理和线虫与寄主问的相互关 系，我们比较分析了不同培养基繁殖的格氏线虫表皮蛋白的差异。我们用人工培养基和大蜡螟 Galleriamellonella 末龄 (5龄)幼虫分别培养得到格氏线虫侵染期幼虫，利用酒精提取表皮蛋白。SDS—PAGE和非变性PAGE分析显 示，大蜡螟来源的格氏线虫的表皮蛋白具有更多的蛋白条带。体外和体内的裂解血细胞实验表明，大蜡螟来源的 格氏线虫的表皮蛋白表现出强烈的裂解血细胞活性，而人工培养基来源的格氏线虫的表皮蛋白活力不明显；且具 有裂解血细胞活性的表皮蛋白为诱导表达型蛋白。不同培养基来源的格氏线虫的表皮蛋白组成的差异和活性的 不同，表明格 氏线虫表皮蛋 白的产生受线虫培养条件影响较大。 关键词：格 氏线虫；表皮蛋 白；培养基；人工培养基；大蜡螟；血细胞 ；裂解活性 中图分类号：Q965．8 文献标识码：A 文章编号：0454-6296(2011)12—1348-06 DifieFence of surface coat proteins in entomopathogenic nematode Steinernemaglaseri(Rhabditida：Steinernematidae)rearedondifferent culturemedia LIUHua，YAOQing，YUANJing—Jing，ZENGHong—Mei，QiUDe—Wen(KeyLaboratoryofIntegrated PestManagementin Crops，Ministry ofAgriculture，InstituteofPlantProtection，ChineseAcademy of AgriculturalSciences．Beijing100081，China) Abstract：Surfacecoatproteins(SCPs)ofSteinernemaglaseriwereprovedtoplayimportantro]esin defeatingthehostimmune system．SCPssuppressinsectimmuneresponse and promote infection of entomopathogenic nematodes． In this study， influences of different culture media on SCPswere investigated，which may provide useful information for further studying the immunosuppressive mechanismsofSCPsandtherelationshipbetweenentomopathogenicnematodesandtheirhosts．Infective iuvenilesofS．glaseriwererearedonanartificialmedium andthelast(5th)instarlarvaeofGaUeria mellonella，respectively，andtheSCPsfrom thesenematodeswereextractedwith ethano1．SDS．PAGE andnative—PAGEanalysisofSCPsindicatedthatSCPsrfom S．glaserinematodesrearedonG．mellonella d