蛋白质和DNA技术.pdfVIP

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第六章 蛋白质和DNA技术 课题研究 20世纪50年代以来,从DNA双螺旋结构模型的建立,到人类 “基因组计划”的完成,再到“蛋白质组”时代的来临,生命科学的 研究取得了令人瞩目的成就,引发了生物技术产业的深刻革命。 DNA的提取、分离和体外扩增,为基因的研究奠定了基础。蛋白质 的提取和分离,则是迈向蛋白质结构和功能研究的第一步。 ▲研究计划 1.查询有关“基因组计划”和 “蛋白质组计划”的必威体育精装版进展情况。 2.尝试蛋白质的提取和分离。 3.尝试PCR技术的基本操作。 ▲总结交流 交流对现代生物技术发展的基本认识,展望生命科学发展的 前景。 ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ 75 第六章 蛋白质和DNA技术 第一节 蛋白质的提取和分离 为年老多病的人注射丙种球蛋白,可 以在一定程度上增强其身体的抵抗力(图 图6-1-1 6-1-1)。在动物体内,丙种球蛋白和许多 丙种球蛋白制品 蛋白质混合在一起。要获得纯净的丙种球 蛋白制品,就必须进行提取和分离。 将生物体内的蛋白质提取出来并加以分离,就 可以得到高纯度的、甚至是单一种类的蛋白质。 目前常用的蛋白质分离提纯技术,包括离心技术、层析技术和电 泳技术(electrophoresis technology)等。其中,电泳技术最为快捷灵 敏、简便易行。 蛋白质含有游离的氨基和羧基,是两性电解质,在一定pH条件 下带有电荷。作为带电粒子,蛋白质在电场中可以向与其自身所带电 荷相反的电极方向移动,这就是电泳现象。蛋白质所带的电荷数越多, 移动得越快;电荷数相同时,颗粒越小,则移动越快。这就是利用电 泳技术分离蛋白质的原理(图6-1-2)。 标 准 蛋白质样品 液 点样处 电 泳 方 向 图6-1-2 电泳原理示意图 凝胶 电泳需要支持物,常用的是聚丙烯酰胺凝胶,由此而来的技术称 为聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,简称 PAGE)。 76 ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ 第一节 蛋白质的提取和分离 不同蛋白质的混合溶液,在经过同一个电场电泳后,会在凝胶 上形成不同的带纹。每一种带纹可能就是一种蛋白质。如果要对每

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