莲藕多酚氧化酶基因PPO的克隆与表达分析.pdfVIP

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2017-09-15 发布于重庆
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莲藕多酚氧化酶基因PPO的克隆与表达分析.pdf

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农业生物技术学报，年，第卷，第期，第页 2011 19 4 634~641 Journal ofAgriculturalBiotechnology,2011,Vol.19,No.4,634~641 研究报告 ALetter 莲藕多酚氧化酶基因 PPO 的克隆与表达分析 ( ) * * ** 张跃进郝晓燕梁宗锁林文超郭宏波西北农林科技大学生命科学学院，杨凌 712100 * 同等贡献作者 ** guohongbo@163.com 通讯作者，摘要为获得莲藕中多酚氧化酶 PPO 基因序列信息及其表达情况，运用技术从莲藕 Ne lumbo ( ) RACE ( nuc ifera Gaertn. ssp.nuc ifera 茎尖中克隆到多酚氧化酶基因全长序列，其 ) cDNA 全长 2 074bp，完整的编码框为，编码个氨基酸，端有非编码区，端有非编码区登陆号为 1503bp 501 5 160bp 3 411bp (GenBank 。采用生物信息学方法发现该蛋白分子量约为，为，具典型的酪氨酸家族结构域， HQ380894) 56.8kD pI 8.60 无信号肽结构，但有跨膜螺旋的亲水性蛋白，琢螺旋和茁折叠分散于整个多肽链中。半定量结果 RTPCR 显示，该基因在莲藕茎尖、幼叶、莲藕鲜切片、花瓣、茎杆种组织中均有表达。方差分析表明，茎尖中 PPO 表 5 达量与幼叶差异不显著，但显著高于其余三个部位；幼叶中表达量与莲藕鲜切片之间差异不显著，但显著高于花瓣和茎杆；花瓣和茎杆中 PPO 表达量最低，两者无显著差异。上述结果说明作为重要分生组织的莲藕茎尖产生的 PPO可能不具活性或极不稳定，随着植株的生长发育被分配到各组织中，在特定时空下被激活并担负相应的职责功能。关键词莲藕，多酚氧化酶，基因克隆，序列全长，基因表达 CloningofPolyphenol Oxidase Gene(PPO) from LotusRhizomeBudandIts Expression inDifferent Tissues * * ** ZhangYuejin HaoXiaoyan LiangZongsuo LinWenchao Guo Hongbo CollegeofLife Sciences,Northwest Agriculture andForestryUn