仪器分析实验-紫外可见分光光度法（CAI）.pptVIP

可 见 分 光光度法实验 * * 指导老师：谭学才 邻二氮菲吸光光度法 测定铁 VIS-7220分光光度计 实验目的： 1．掌握光度法测定铁的原理及方法。 2．学会VIS-7220分光光度计的正确使用。 3．学习如何选择吸光光度分析的实验条件。 方法原理： 邻二氮菲(o-ph)是测定微量铁的较好试剂。在pH＝2～9 的溶液中，试剂与Fe 2+生成稳定的红色配合物，其lgK形＝21.3， 摩尔吸光系数ε = 1.1×104，其反应式如下： Fe 2+ + 3(o-ph) ? Fe(o-ph)3 红色配合物的最大吸收峰在510nm波长处。当铁为+3价时，可用盐酸羟胺还原， 本方法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn 2 +、Al 3+、Ca 2+、Mg 2+、Zn 2+、SiO3 2-，20倍Cr 3+、Mn 2+、V(V)、PO4 3-，5倍Co 2+、Cu 2+等均不干扰测定。 主要仪器及试剂： 1. 7220分光光度计，10mL吸量管，50mL比色管8支，1cm比色皿，瓷坩埚，电炉，马弗炉。 VIS-7220分光光度计 2．铁标准溶液：含铁0.1mg/ml。 准确称取0.8634g的NH4Fe(SO4)2·12H2O，置于烧杯中，加入20ml1:1HCl和少量水,溶解后,定量地转移至１升容量瓶中，以水稀释之刻度，摇匀。 3．邻二氮菲：0.15％(10-3mol/L)新配制的水溶液。 4．盐酸羟胺： 10％水溶液（临用时配制） 5．醋酸钠溶液 1mol/L 6．NaOH 1mol/L 7．HCl 6 mol/L 8．工业盐酸 测定步骤： 1．吸收曲线的制作和测量波长的选择： 用吸量管吸取0.0，1.0mL铁标准溶液，分别注入两个50mL比色管中，各加入1mL盐酸羟胺溶液，2mL邻二氮菲，5mL NaAc，用水稀释至刻度，摇匀。放置10min后，用1cm比色皿，以试剂空白（即0.0mL铁标准溶液）为参比溶液，在440～560nm之间，每隔10nm测一次吸光度，在最大吸收峰附近，每隔5nm测定一次吸光度。在坐标纸上，以波长λ为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A和λ关系的吸收曲线。从吸收曲线上选择测定Fe的适宜波长，一般选用最大吸收波长λmax。 2．标准曲线的制作： 用移液管吸取100μg·mL-1铁标准溶液10mL于100mL容量瓶中，加入2mL 2mol·L -1的HCl，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液每毫升含Fe 3+ 10μg。 在6个50mL比色管中，用吸量管分别加入0.0, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0 mL 10μg·mL -1铁标准溶液，分别加入1mL盐酸羟胺，2mL Phen，5mL NaAc溶液，每加一种试剂后摇匀。然后，用水稀释至刻度，摇匀后放置10 min。用1cm比色皿，以试剂为空白（即0.0mL铁标准溶液），在所选择的波长下，测量各溶液的吸光度。以含铁量为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。 用绘制的标准曲线，重新查出相应铁浓度的吸光度，计算Fe 2+－Phen络合物的摩尔吸光系数 3．试样中铁的测定 准确移取5mL样液至50mL容量瓶后，加盐酸羟胺2mL，Phen 2mL，1mol·L -1 NaAc 10mL，加水稀释至刻度，摇匀。测量吸光度A。根据标准曲线求出试样中铁的含量（μg·mL -1）。 （ （ * *