一种斑马鱼原始造血髓系细胞突变体的研究.pdfVIP

2011;31(5) 南方医科大学学报（J South Med Univ ） ·755 · ·基础研究· 一种斑马鱼原始造血髓系细胞突变体的研究 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 1 颜 广 ，刘 伟 ，戴朝霞 ，王 鹍 ，刘 靖 ，赵灵凤 ，黄志斌 ，陈小辉 ，马 宁 ，孟 萍 ，许孟畅 ，温子龙 ，张文清 1 2 南方医科大学基础医学院细胞生物教研室，广东 广州 510515 ，香港科技大学生化系，香港 摘要：目的斑马鱼原始造血髓系细胞突变体1276 的表型鉴定及性状分析。方法 利用化学诱变剂N-乙基-N-亚硝基脲诱 变野生型AB 斑马鱼雄鱼的精原细胞，突变基因组保留传代，采用中性红染液对F3代的胚胎进行细胞化学染色，筛选原始 造血髓系细胞突变体。并通过细胞化学染色及检测不同谱系血细胞标记基因在不同发育阶段的mRNA 及蛋白的表达水 平，对其中之一突变体1276进行表型鉴定及性状分析。结果 成功筛选1296个F2 家族，2140 个突变基因组，发现中性红 染色信号异常突变体12个。突变体1276在原始造血阶段，中性红染色全身信号缺失，小胶质细胞标记基因apoe 表达缺 失，巨噬细胞标记基因l-plastin ，头部表达减少，背主动脉壁腹侧区域表达正常，粒细胞、红细胞均未见异常；在定向造血阶 段，巨噬细胞仍存在异常，但粒细胞、红细胞、淋巴细胞以及造血干细胞均未见明显异常。结论 突变体1276在原始造血 阶段，巨噬细胞存在功能障碍，以及不同程度发育及迁徙异常；在定向造血阶段这一性状并未得到代偿。 关键词：斑马鱼突变体；N-乙基-N-亚硝基脲诱变筛选；中性红；原始髓系造血；巨噬细胞；小胶质细胞 中图分类号：Q954.67 文献标志码：A 文章编号：1673-4254（2011）05-0755-06 Study of a new zebrafish mutant defective in primitive myelopoiesis 1 1 1 1 1 1 1 1 1 YAN Guang , LIU Wei , DAI Zhao-xia , WANG Kun , LIU Jin , ZHAO Ling-feng , HUANG Zhi-bin , CHEN Xiao-hui , MA Ning , 1 1 2 1 MENG Ping , XU Meng-chang , WEN Zi-long , ZHANG Wen-qing 1Department of Cell Biology, School of Basic Medical Science, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China; 2Department of Biochemistry, Hong Kong University of Science and Technology, Hong Kong, China Abstract: Objective To perform phenotypic identification and characteristic analysis of a new zebrafish mutant 1