第一类显微镜观察类.docVIP

） 第 一 类 ： 显 微 镜 观 察 类 实 验 实验步骤 ：①取材 ②固定 ③染色 ④压片 ⑤镜检 用显微镜观察多种多样的细胞（1-P7） 显微镜 组成：光学部分：目镜（长的倍数小）、物镜（长的倍数大）、反光镜； 机械部分：镜座、镜柱、镜臂…… 使用：取镜→安放→对光→放置玻片标本→观察→使用高倍显微镜 1）正确使用低倍镜：取镜——对光——安放装片——下降镜筒——调焦。下降镜筒时，必须双眼注视物镜和装片的距离，以免压坏装片和碰坏物镜。 注意：2）正确使用高倍镜：将低倍镜下看到的物像移到视野中央——转动转换器，换用高倍物镜——调整光圈和反光镜，使视野亮度适宜——调节细准焦螺旋，直至物像清晰。 3）视野中异物的位置判断只有三种可能——在装片上、在目镜上、在物镜上。 观察DNA 、RNA在细胞中的分布(1-p26) 实验原理： 染色剂 染色颜色 主要存在部位 DNA 甲基绿 绿色 主要在细胞核，线粒体、叶绿体含少量 RNA 吡罗红或派洛宁染液 红色 主要在细胞质 实验步骤：取口腔上皮细胞制片(将载玻片烘干） 水解 冲洗涂片 染色 观察 滴 刮 涂 烘 （0.9%的NaCl：固定细胞正常形态） 解 保 （8%的HCl，能改变细胞膜的通透性，同时使DNA与蛋白质分离） 染 洗 盖 冲 洗 （蒸馏水） （先低倍镜再高倍镜/选择染色均匀、色泽浅的区域） 观察线粒体和叶绿体(1-p４7) 实验原理：1.高等绿色植物的叶绿体存在于细胞质基质中，叶绿体一般是 绿 色的，扁平的 球 形或 椭球 形，可以用高倍显微镜观察它的形态和分布。 2.健那绿染液是专一性的染线粒体的活细胞染料。可以使活细胞的线粒体呈现 蓝绿 色，而细胞质几乎为无色，线粒体形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。 实验目的：使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布 观察叶绿体装片：取材：藓类小叶或黑藻叶或波菜叶稍带叶肉的下表皮，（叶片薄且叶绿体大，数目少） 制片：载玻片中央滴一滴清水，将叶片放入，加上盖玻片，制成临时装片（临时装片随时保持有水状态） 观察：先 低 倍镜找到叶片细胞，后高倍镜观察叶绿体（形态和分布）（光强度的变化与叶绿体的位置关系） 绘图：用铅笔画一个叶绿体形态和分布情况清楚的叶肉细胞 观察细胞质的流动 ：注意事项 1、黑藻事先应放在光照充足、水温较高条件下培养3－4小时。2、选取幼嫩小叶。3、选择靠近叶脉或接近叶片基部部位观察。 （叶脉部位细胞水分供应充足）4、临时装片内的材料应始终保持有水状态 。 注意：在同一细胞内，细胞质流动的方向一致。不同的细胞，细胞质流动可朝一个方向，也可朝不同的方向。这时细胞器随细胞质基质一起运动，并非只是细胞器的运动。 提高细胞质流动性的方法：进行光照；升高水温；切伤一小部分叶片。 观察植物细胞的质壁分离与复原(1-P61) 实验原理： 外因： 实验材料及试剂：紫色洋葱磷片叶（液泡大且液泡含花青素有颜色易观察）0.3g/ml的蔗糖溶液，用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。 实验方法与步骤：（1）配制0.3g/ml的蔗糖溶液 （2）撕下一小块洋葱鳞片叶紫色的外表皮制成临时装片 （3）低倍镜下观察正常细胞，可看到原生质层紧贴着细胞壁，还可看到紫色的大液泡。 （4）向载玻片上盖玻片一侧滴加质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液，在另一侧用吸水纸吸引，使细胞浸在蔗糖溶液中 （5）用高倍镜观察质壁分离现象。 （6）向载玻片上盖玻片一侧加清水，在另一侧用吸水纸吸引使用细胞浸在清水中 （7）用高倍观察复原了的细胞。 详细实验步骤及注意问题： 步骤 1．制作洋葱表皮的临时装片。 在载玻片上滴一滴水，撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平（也可挑取几条水绵放入水滴中）。盖上盖玻片。 2．观察洋葱（或水绵）细胞可看到：液泡大，呈紫色，原生质层紧贴着细胞壁。（或水绵细胞中有带状叶绿体，原生质层呈绿色，紧贴着细胞壁。 3．观察质壁分离现象。从盖玻片的一侧滴入0．3g/ml的蔗糖溶液，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次。镜检。观察到：液泡由大变小，颜色由浅变深，原生质层与细胞壁分离。原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。 4．观察细胞质壁分离的复原现象。 从盖玻片的一侧滴入清水，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次。