茎瘤芥“涪杂2号”品种的DNA提取优化方案.docVIP

【标题】茎瘤芥“涪杂2号”品种的DNA提取优化方案 【作者】汤 玲 【关键词】茎瘤芥“涪杂2号”? DNA提取优化方案? SDS? CTAB 【指导老师】江 波 【专业】生物科学 【正文】.前言茎瘤芥（Brassica juncea var. tumida Tsen et Lee），又名榨菜、青菜头、菱角菜、包包菜，双子叶植物纲，十字花科，芸苔属，芥菜种叶芥亚种，大叶芥变种的变种，其膨大的肉质茎上每一叶基外侧均有明显的瘤状突起3?- 5个，是涪陵榨菜的重要原料。它可以制成各种芥菜鲜销供食，又可进行加工腌制，不仅畅销国内，还可出口国外。其分布范围较广，栽培历史悠久，是我国传统的鲜食和加工蔬菜。目前已经成为涪陵区乃至重庆市农村经济中产销规模最大、品牌知名度最高、辐射带动能力最强的传统支柱产业、优势产业。涪陵区是榨菜的发源地和集中产地，被誉为中国的榨菜之乡。因此“涪陵榨菜”为涪陵特产，具有独特的品味和浓烈的地方特色。成品榨菜有开胃健脾、辛忾添精、增食助神、醒酒、诱茶、防晕车、晕船、防癌抗癌、利尿除湿、消炎治外伤等功效。涪陵榨菜、南充冬菜、宜宾芽菜、内江大头菜列为四川省四大名腌菜，并与法国的酸黄瓜、德国的甜酸甘蓝一起,?并称世界三大名腌菜。“涪杂2号”是早播早熟的杂交茎瘤芥（榨菜）新品种，该品种最显著的特点是叶片较直立，株型紧凑，耐肥，较耐病毒病和霜霉病，耐冻害能力强，丰产性好，抽薹较晚，特别是早播而不出现先期抽薹。瘤茎形状美观,皮薄筋少,加工品质好。即含水量低，脱水速度快，加工成菜率和品质与“永安小叶”相当。适宜重庆及四川盆地茎瘤芥产区种植，对于提高重庆市榨菜产区乃至整个四川盆地榨菜原料的产量和质量，促进榨菜生产的发展和技术进步，巩固重庆“涪陵榨菜”的宗祖地位，必将发挥重大的作用和产生深远的影响。目前对“涪杂2号”的研究主要集中在宏观方面，在微观分子水平上的研究尚属贫瘠地带。我们要探究茎瘤芥“涪杂2号”较其它榨菜品种的特殊之处在何处，就必须要探讨“涪杂2号”的分子特性，而建立基因文库、进行RAPD鉴定、微卫星标记等分子生物学操作首先需要高质量的基因组DNA。为获取高质量“涪杂2号”的总DNA就显得尤为重要。2.文献综述2.1茎瘤芥“涪杂2号”的生物学特性茎瘤芥（Brassica juncea var. tumida Tsen et Lee）又名榨菜，俗称青菜头，为双子叶植物纲，十字花科，芸苔属，芥菜种叶芥亚种，大叶芥变种的变种。“涪杂2号”是杂交茎瘤芥（榨菜）新品种，涪杂2号是笔者继涪杂1号[1]选育成功后,以自育茎瘤芥胞质雄性不育系96154?- 5A为母本,自交系920145?为父本配制而成的茎瘤芥一代杂种。母本96154?- 5A系利用云南省农业科学院油料研究所的芥菜型油菜不育系欧新A?(Ouxi2nA)为不育源,茎瘤芥优良地方品种永安小叶为父本,通过杂交和连续7次以上回交培育而成[2],该不育系不育性状稳定,不育度100?%?,?不育株率100?%?,经济性状良好。父本920145是利用浙江省地方品种半碎叶经3代优良单株自交和2代系内自交选育而成。‘涪杂2号’株高46～52 cm,开展度66 cm,株型紧凑;叶长椭圆形,深绿色,叶面微皱,无蜡粉,少刺毛,叶缘有不规则细锯齿,裂片4～5对;瘤茎近圆球形,浅绿色,瘤茎上每一叶基外侧着生肉瘤3个，中瘤稍大于侧瘤,肉瘤钝圆,间沟浅[3]。‘涪杂2号’能在8月下旬〔比正常播期提早15 d?(天)?〕播种,翌年1月上中旬〔比正常收获提早45 d?(天)?〕收获。抗逆性强,品质优良,鲜食、加工均可,适宜重庆及四川盆地茎瘤芥产区种植,营养生长期150～155 d?(天)?,丰产性好,一般每667 m2?瘤茎产量2 500～3 000 kg,高产可达3 500 kg以上。2.2茎瘤芥“涪杂2号”研究现状目前对“涪杂2号”的研究主要集中在育种、栽培和加工三个方面：在育种方面，李林基和聂琼玲通过对制种地的选择，适时移栽,合理密植，加强制种田肥水管理，加强病虫害防治，及时去杂去劣,?砍除父本和收获等操作，对杂交茎瘤芥“涪杂2?号”进行育种[4]。在栽培方面，我国对茎瘤芥研究主要集中在栽培技术[5]和病害的发生与防治[6]两方面：一方面可以通过选择优良品种进行播种[7]、播期和密度的合理选择[8]、及平衡施用氮、磷、钾化学肥料[9]等提高“涪杂2号”的质量和产量。另一方面通过采取一定措施防治危‘涪杂2号’产生病害。危害茎瘤芥的病害主要有十字花课植物病毒病、根肿病、霜霉病、根腐病、真菌性软腐病和细菌性软腐病[10]，从而提高“涪杂2号”的质量和产量。在加工方面，目前风脱水和盐脱水是对涪陵榨菜的两种加工工艺，榨菜经两种工艺加工成熟后，亚硝酸盐含量低微，食用是安全的[1