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一、菊花的组织培养 1. 基本过程:离体的________________→____________→试管苗→移栽 对应学生用书201页 2.影响植物组织培养的因素 3. 实验操作:制备MS固体培养基→________→________→培养→移栽→栽培 二、月季的花药培养 1.被子植物的花粉发育 3.影响花药培养的因素 4.实验操作 自主核对: 一、植物组织或细胞 愈伤组织 差别很大 未开花 新萌生 N、P、K、Ca、Mg、S B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 细胞分裂素 细胞分裂 再分化 18~22℃ 外植体消毒 接种 二、减数分裂 单核期 双核期 胚状体 生根 愈伤组织 生根 诱导花粉植株 诱导成功率 亲本植株 材料的选择 培养基的组成 镜检 花粉 醋酸洋红法 焙花青—铬矾法 蓝黑色 1.菊花茎的组织培养和月季花药的培养有何区别? 2.影响植物组织培养的因素有哪些? 考点1 植物组织培养的原理和过程 1.植物组织培养原理 植物组织培养的原理是植物细胞的全能性。不同细胞的全能性不一样。生物体的所有细胞全能性大小比较如下: a.受精卵生殖细胞体细胞; b.体细胞中幼嫩植物组织(如芽尖)成熟组织细胞。 对应学生用书201页 (2)月季的花药培养 (3)花粉植株的产生与植物茎的组织培养比较 菊花茎的组织培养 月季的花药培养 理论依据 细胞的全能性 基本过程 脱分化、再分化 影响因素 选材、营养、激素、pH、温度、光照等 操作流程 制备培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培 选材→材料消毒→接种和培养→筛选和诱导→移栽→栽培选育 不 同 点 选材 体细胞 生殖细胞(精子) 生殖 方式 无性生殖 有性生殖 重要考点提示 1. 植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗逆性差,对培养条件要求较高。 2. 培养材料一旦被微生物污染,就会导致实验失败。原因是微生物增殖快,生长迅速,消耗养分多,并产生代谢废物毒害培养材料。无菌技术主要包括对操作空间、实验用具、实验材料以及操作者的灭菌或消毒。 例1 植物细胞表现出全能性的必要条件是( ) A.导入其他植物细胞的基因 B.将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内 C.用适当浓度的秋水仙素处理 D.脱离母体后,给予适宜的营养和外界条件 [答案] D 例2 花药培养技术与植物组织培养技术的不同之处在于( ) A.培养基配制方法 B.无菌技术 C.接种操作 D.选材 [解析] 花药离体培养属于一种特殊的植物组织培养技术,在培养基的配置方法、接种操作与无菌操作等方面都是相同的,但花药离体培养的选材与普通的植物组织培养不同,前者是利用植物的配子培养获得个体,后者则是培养离体体细胞。 [答案] D 考点2 影响组织培养的因素与激素的应用 1. 影响组织培养的因素 (1)内因:植物的种类,同一种植物材料的年龄、保存时间的长短、部位等。 2. 植物激素在组织培养中的重要应用 生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素,其作用及特点为: (1)在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。 (2)使用顺序不同,结果不同,具体如下: 使用顺序 实验结果 先使用生长素,后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂,但细胞不分化 先使用细胞分裂素,后使用生长素 细胞既分裂又分化 同时使用 分化频率提高 (3)用量比例不同,结果也不同: 例3 影响植物组织培养的因素包括( ) ①培养基的配制 ②外植体的选取 ③激素的应用 ④消毒 ⑤温度、pH、光照 A.①②③④⑤ B.①②③ C.①②③④ D.①②③⑤ [答案] A 例4 某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染,为查找污染原因设计了4个实验,实验条件除图示外其他均相同。下列各图表示实验结果,据图可得出的初步结论是(多选)( ) A.污染主要不是培养基灭菌时间短造成的 B.污染主要来源于组织培养所用的离体组织 C.调节培养基pH不能解决污染问题 D.调节培养温度不能解决污染问题 [解析] 由图可知,培养基的灭菌时间、pH以及培养温度对污染率的影响不大;离体组织灭菌时间越长污染率越低,说明离体组织是污染的主要来源。 [答案] ABCD 【典例1】 人参是一种名贵中药材,其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下: 对应学生用书202页 请回答: (1)配制诱导愈伤组织的固体培养基,分装后要进行________。接种前,要对人参根进行________。 (2)用于离体培养的根切块,叫做________。培养几天后发现少数培养基被污染,若是有颜色的绒毛状菌落,属于________污染;若是有光泽的黏液状菌落,属于________污染。 (3
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