生产菌种的来源.pptVIP

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第二章 生产菌种的来源 微生物工程的工业生产三个要素: 生产菌种的性能 发酵及提纯工艺条件 生产设备 其中优良的菌种是最重要的。 微生物是发酵工业的灵魂(张星元、木下祝郎); “微生物细胞”是生物学的概念;“微生物细胞机器”是工程学的概念。菌种微生物细胞是对应的发酵产物的细胞机器,因此是有工业生产个性的微生物细胞。微生物细胞机器是从天然的微生物细胞改造成的,因此天然的微生物具有成为微生物细胞机器的潜在能力。 ; 菌种是发酵成功的内因。若设备条件已确定, 可通过改良菌种挖掘生产潜力;在设备、菌种确定的情况下, 可通过优化发酵工艺条件发挥菌种潜力。 优良菌种可大幅度增加生产,提高产品质量,简化操作,提高经济效益。 ;微生物工程的常用菌种及其作用;细 菌;放 线 菌;酵 母 菌;霉 菌;???子菌: 藻类:螺旋藻,单胞藻生产石油 生物工程菌:胰岛素、干扰素等。;二、生物物质产生菌的筛选 2.1.微生物是生物活性物质的丰富资源 微生物是地球上分布最广、物种最丰富的生物种群,所以微生物现在和将来都是具有各种生物活性的新产物的丰富资源。 ;微生物的生长环境;;陆地和水域中 未被培养微生物比例的估计;; 如何筛选? 关键在于要根据生产实际需要、目的代谢产物的性质、可能产生所需产物微生物菌种的分类地位、这类微生物分布、特性以及生态环境等,设计选择性高的分离筛选方法,才能快速从可能的环境和混杂的多种微生物中获得所需菌种。;一般菌种分离纯化和筛选步骤如下: 标本采集 标本材料的预处理 富集培养 菌种初筛 菌种复筛 性能鉴定 菌种保藏。 ;;骤韦李揽押阁位概依寅施皋纳胆楞吩岛故腋昭披渤昔酥垮鸡抚买奴琵肆原2-生产菌种的来源2-生产菌种的来源;2.1.3.标本的预处理 (1)采用热处理方法减少材料中的细菌数 (2)采用膜过滤和离心的方法浓缩水中的细胞 (3)采用化学方法 (4)诱饵法:将固体基质(如蛇皮、花粉)等加到待检的土壤或水中,待其菌落长出后再铺平板分离。 (5)空气搅拌法 :在空气中搅拌,收集孢子沉淀,如稻草的处理。 ;拇嫂蚤谜报锣猛坤排撵提棚矾瓮灭退胁剿垫忍玲醋围买狠滴邯物熟早啊脖2-生产菌种的来源2-生产菌种的来源; 在采集的样品中,如果目的微生物是优势菌,则可以直接分离纯化,但多数情况下不是优势菌,因此需要设法增加分离菌的数量,这就需要进行富集培养。 富集培养:又称增殖培养,就是利用不同微生物生长对环境和培养基的特殊要求,设计选择性培养基,创造有利的生长条件,使目的微生物在最适环境中大量繁殖,由原来自然条件下的劣势种变为人工环境下的优势种,以利于分离。 ;逗援颂腿忿伏钠咆碉速课豁罩硫绳恫姆湛媚想披褪营克雀盔坠具知腑斌喜2-生产菌种的来源2-生产菌种的来源;2.2 菌种的分离 1 施加选择性压力分离法 2 随机分离方法 ;2.2.1 施加选择性压力分离法 利用不同种类的微生物对环境和营养要求的不同,人为控制这些条件,使之利于某类或某种微生物的生长,而不利于其他种类微生物的生存,以达到使目的菌种占优势,而得以快速分离纯化的目的。 分离培养基的效率取决于其养分,pH和加入的选择性抑制剂等。 ;宣砧颈假蛋豆漓骄痊应违段势徘缕雹击杯逢漫蚤诊婉型沈展撞鸿刑雏婶靛2-生产菌种的来源2-生产菌种的来源;疮滋纬答属二尘挽铅县码暴驶藉讼舰啥特铱淌酮签焙氏碳矩丛嚎歹型遗侗2-生产菌种的来源2-生产菌种的来源;培养方法:液体培养方法和固体培养方法 固体培养方法:固体培养基常用于分离某些酶产生菌,其选择培养基中常含有所需酶的基质,以便促进酶产生菌的生长。 如蛋白酶、脂肪酶、果胶酶等。 液体培养方法:摇瓶培养(分批式富集培养) 连续培养(恒化式富集培养)。 ;摇瓶培养(分批式富集培养):是指将富集培养物转接到新的同一种培养基中,重新建立选择性压力,如此反复转种几次后,再取此富集培养物接种到固体培养基上,以获得单菌落。 转种的时间是关键,应在所需菌种占优势的情况下移种。 ;连续培养(恒化式富集培养):通过改变限制性基质的浓度来控制两类不同菌株的比生长速率。 ;2.2.2 随机分离方法 有些微生物的产物对产生菌的筛选没有任何选择性好处,因此,常采用随机的方法分离所需菌种。 1. 抗生素产生菌的分

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