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生物科学考研实验技能题解答

一、选择题（每题2分，共20题）

1.在进行琼脂糖凝胶电泳时，若DNA样品在电场中向负极移动，说明该DNA片段的碱基序列中（）。

A.G和C含量较高

B.A和T含量较高

C.G和C含量较低

D.A和T含量较低

2.在PCR实验中，若扩增产物出现非特异性条带，可能的原因是（）。

A.引物设计不合理

B.循环数过多

C.模板DNA浓度过高

D.DNA聚合酶活性不足

3.在进行蛋白质SDS电泳时，若蛋白质条带出现弥散现象，可能的原因是（）。

A.SDS浓度过低

B.凝胶浓度过高

C.蛋白质样品未充分变性

D.电泳缓冲液pH值不合适

4.在进行酶动力学实验时，若底物浓度过高导致反应速率不再增加，该反应属于（）。

A.线性反应

B.零级反应

C.一级反应

D.二级反应

5.在进行细胞培养实验时，若细胞出现过度增殖，可能的原因是（）。

A.培养基中血清含量过低

B.CO?浓度过高

C.温度控制不当

D.细胞密度过高

6.在进行植物组织培养实验时，若愈伤组织出现玻璃化现象，可能的原因是（）。

A.水分过多

B.激素比例不当

C.光照强度过高

D.环境湿度过低

7.在进行基因克隆实验时，若载体质粒的插入方向错误，可能导致（）。

A.基因表达量降低

B.质粒无法复制

C.基因表达量不变

D.质粒稳定性提高

8.在进行流式细胞术分析时，若细胞荧光信号过强，可能的原因是（）。

A.荧光标记抗体浓度过高

B.激光强度过低

C.细胞固定不充分

D.染料淬灭过度

9.在进行代谢组学实验时，若样品前处理不当导致代谢物降解，可能的原因是（）。

A.样品储存温度过高

B.提取溶剂选择不当

C.样品处理时间过长

D.样品保存容器不密闭

10.在进行微生物培养实验时，若培养皿中出现杂菌污染，可能的原因是（）。

A.无菌操作不规范

B.培养基pH值不合适

C.温度控制不当

D.培养皿灭菌不彻底

二、简答题（每题5分，共10题）

1.简述琼脂糖凝胶电泳的原理及其在DNA分析中的应用。

2.简述PCR反应的五个关键组成部分及其作用。

3.简述蛋白质SDS电泳的原理及其在蛋白质分离中的应用。

4.简述酶动力学实验中米氏方程的含义及其应用。

5.简述细胞培养实验中CO?浓度的作用及其调节原理。

6.简述植物组织培养实验中激素比例对愈伤组织生长的影响。

7.简述基因克隆实验中质粒载体的选择标准及其作用。

8.简述流式细胞术分析中荧光信号的检测原理及其影响因素。

9.简述代谢组学实验中样品前处理的重要性及其常见方法。

10.简述微生物培养实验中无菌操作的必要性及其具体措施。

三、实验设计题（每题10分，共5题）

1.实验目的：设计一个实验方案，验证某种植物生长调节剂对愈伤组织生长的影响。

实验步骤：

（1）选择生长状态一致的愈伤组织，分为对照组和实验组；

（2）对照组添加基础培养基，实验组添加不同浓度的生长调节剂；

（3）在相同条件下培养一段时间后，观察愈伤组织的生长情况并记录数据；

（4）分析实验结果并得出结论。

2.实验目的：设计一个实验方案，检测某基因在特定组织中的表达水平。

实验步骤：

（1）提取不同组织中的总RNA；

（2）将RNA反转录为cDNA；

（3）设计特异性引物进行PCR扩增；

（4）通过凝胶电泳检测PCR产物，比较不同组织中的基因表达水平。

3.实验目的：设计一个实验方案，筛选对某抗生素具有抗性的菌株。

实验步骤：

（1）将含抗生素的培养基分为对照组和实验组；

（2）将待筛选的微生物接种到培养基上；

（3）观察并记录不同组中微生物的生长情况；

（4）筛选出在实验组中生长的菌株，并进行进一步验证。

4.实验目的：设计一个实验方案，检测某蛋白质的酶活性。

实验步骤：

（1）制备酶粗提液；

（2）设置底物浓度梯度，测定酶促反应速率；

（3）根据米氏方程计算酶的Km值；

（4）分析实验结果并得出结论。

5.实验目的：设计一个实验方案，验证某基因敲除对细胞表型的影响。

实验步骤：

（1）构建基因敲除细胞系；

（2）比较敲除细胞与野生型细胞的表型差异；

（3）通过WesternBlot检测目标蛋白的表达水平；

（4）分析实验结果并得出结论。

四、操作题（每题15分，共4题）

1.操作步骤：描述如何进行琼脂糖凝胶电泳，并说明每一步的注意事项。

步骤：

（1）制备琼脂糖凝胶；

（2）将DNA样品与上样缓冲液混合；

（3）将样品加载到凝胶孔中；

（4）接通电源进行电泳；

（5）电泳结束后进行染色观察。

注意事项：

（1）凝胶浓度应根据DNA片段大小选择；

（2）电泳缓