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探寻马氏珠母贝抗多毛类寄生虫病的基因密码:候选基因筛选与解析
一、引言
1.1研究背景
马氏珠母贝(Pinctadamartensii),又称合浦珠母贝,在海水珍珠养殖产业中占据着举足轻重的地位。它是培育海水珍珠的主要贝类,所产珍珠产量占我国整个海水珍珠产量的95%以上。中国南珠,便是指在中国南海海域用马氏珠母贝养殖的海水珍珠,自古就有“西珠不如东珠,东珠不如南珠”之说,可见其品质之高。广东、广西、海南等地凭借着热带、亚热带海洋性气候,几千千米长的海岸线及众多的岛屿和港湾,常年适宜的海水温度和稳定的盐度,以及丰富的饵料生物,为马氏珠母贝的养殖提供了得天独厚的条件,海水珍珠产业已成为这些沿海部分地区的支柱产业,也是当地群众脱贫致富的重要途径。
然而,马氏珠母贝养殖业一直遭受着多毛类寄生虫病的严重威胁。多毛类寄生虫病是世界性的贝类病害,已报道众多养殖贝类深受其害,给贝类养殖业带来了巨大损失。在中国海水珍珠养殖中,多毛类寄生虫主要由凿贝才女虫(Polydoraciliata)引起,由于其能分泌腐蚀贝壳的物质,导致壳内面常在窝心或中心部位出现黑褐色的痂皮,因此该病又被俗称为“黑心肝病”或“黑壳病”。相关研究表明,该病主要集中在2-3龄贝和育珠贝中,在流行群体中,患病贝比例高达2/3以上,若使用患病贝插核,死亡率更是可达70%以上。石耀华等人对中国主要海水珍珠养殖海域7个养殖场的11个养殖群体马氏珠母贝多毛类寄生虫病的调查发现,广西防城港市江山镇、北海市营盘镇、深圳市大鹏镇和海南省陵水县新村镇的珍珠养殖场感染尤为严重,感染率在76%以上,而广东省雷州市谭斗镇、徐闻县大井镇和海南省陵水县黎安镇的养殖场感染程度相对较低,感染率在40%以下。多毛类寄生虫病不仅导致马氏珠母贝大量死亡,还极大地影响了海水珍珠的产量和质量,严重制约着我国珍珠养殖业的健康发展。
1.2研究目的和意义
本研究旨在筛选出马氏珠母贝抗多毛类寄生虫病的候选基因,为从基因层面揭示马氏珠母贝抗多毛类寄生虫病的分子机制提供理论依据。通过深入了解这些候选基因的功能和作用方式,能够为后续培育具有高抗多毛类寄生虫病能力的马氏珠母贝新品种提供关键的基因资源和技术支持。在实际生产中,利用这些研究成果,可以通过遗传选育等手段,培育出抗病性强的马氏珠母贝品种,降低多毛类寄生虫病的感染率和死亡率,提高海水珍珠的产量和质量,从而有效减少养殖户的经济损失,促进马氏珠母贝养殖业的可持续、健康发展,对于提升我国海水珍珠产业在国际市场上的竞争力也具有重要意义。
1.3国内外研究现状
在国外,对于贝类多毛类寄生虫病的研究开展较早,涉及多种养殖贝类,对多毛类寄生虫的生物学特性、感染机制以及对贝类生长、存活和繁殖的影响等方面进行了较为深入的研究。然而,针对马氏珠母贝抗多毛类寄生虫病基因筛选的研究相对较少。
在国内,石耀华等对中国养殖马氏珠母贝多毛类寄生虫病进行了调查,明确了该病在我国主要海水珍珠养殖海域的感染情况及流行特点。王爱民等通过不同地理种群内自繁和种群间杂交子一代感染多毛类寄生病的分析,发现种群间杂交一代初步提高了马氏珠母贝抗多毛类寄生虫病的能力。但目前对于马氏珠母贝抗多毛类寄生虫病的分子机制研究还处于起步阶段,筛选出的抗病相关基因数量有限,对这些基因的功能验证和作用机制的研究还不够深入。现有研究主要集中在构建cDNA文库、差异显示等技术来筛选差异表达基因,但对于基因的功能验证,如通过基因敲除、过表达等实验手段来明确基因在抗多毛类寄生虫病过程中的具体作用,还鲜有报道。此外,对于马氏珠母贝免疫系统与多毛类寄生虫相互作用的分子机制研究也有待加强,这将有助于更全面地理解马氏珠母贝的抗病过程,为抗病育种提供更坚实的理论基础。
二、马氏珠母贝及其多毛类寄生虫病概述
2.1马氏珠母贝生物学特性
马氏珠母贝隶属于软体动物门(Mollusca)双壳纲(Bivalvia)珍珠贝目(Pterioida)珍珠贝科(Pteriidae),是一种重要的海水养殖贝类,也是生产珍珠的主要母贝。其贝壳斜四方形,背缘略平直,腹缘弧形,前、后缘弓状。前耳突出,近三角形;后耳较粗短,边缘鳞片致密,末端稍翘起。左壳稍凸,右壳较平,右壳前耳下方有明显的足丝凹陷,足丝毛发状。壳内面铰合线较平直,铰合部有1主齿,沿铰合线下方有一长条齿片,韧带黑褐色,约与铰合线等长。壳内面珍珠层较厚,坚硬且有光泽,角质层灰黄褐色,间有黑褐色带。
马氏珠母贝生活在热带、亚热带海区,自然栖息于水温10℃以上的内湾或近海海底,水深一般在10米以内,分布范围较窄。成体终生以足丝附着在岩礁石砾上生活,适宜水温范围为10-35℃,在6-7℃或36-40℃时会死亡,适应盐度变化的范围约为
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