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浙江大学博士学位论文致谢

至此，我再一次向所有给予我关心和帮助的老师、家人和同学们，致以最真挚的感

谢。我将带着你们的关爱和支持继续努力前行。

此次论文撰写完成于新型冠状病毒疫情期间，全国上下众志成城抗击疫情。看

到新闻报道里有众多医务人员积极走上抗疫一线负重前行，其中也有自己熟悉老

师的身影，他们是吾辈学习之楷模，在此向他们衷心地表达敬意。不管是科研岗位

的老师还是临床岗位的老师都在尽自己所能为抗击疫情贡献一己之力。可惜因为

还是毕业生，没有机会走上一线贡献一份力量，但是他日走向工作岗位，我会学习

他们的精神，将自己所学用于缓解人类之病痛，以感谢祖国、感谢学校、感谢所有

老师们和父母对我的培养。

II

浙江大学博士学位论文中文摘要

肠道菌群影响小鼠乙肝疫苗应答能力的机制研究

浙江大学医学院内科学（传染病）

博士研究生刘秋霞

导师阮冰教授

中文摘要

目的：

由乙型肝炎病毒（HepatitisBvirus，HBV）感染引起的乙型肝炎仍是世界范

围内的一个公共问题。预防接种乙肝疫苗是降低HBV感染并阻断HBV传播的有

效方法。无乙肝表面抗体保护的人群有感染HBV的风险，目前关于乙肝疫苗无

应答的机制尚无明确解释。研究表明，肠道微生态可影响固有免疫和适应性免

疫，通过粪菌移植将健康供体粪便微生物转移至患病个体胃肠道可调节肠道菌

群。本研究旨在通过抗生素混合物干预小鼠肠道菌群和通过粪菌移植重建肠道菌

群后，探讨肠道菌群对小鼠乙肝疫苗应答能力的影响并初步探讨其发生机制。

方法：

本研究采用的实验方法包括：1.用抗生素混合物干预成年小鼠和幼年小鼠的

肠道菌群，给其注射乙肝疫苗后用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血浆中乙肝

表面抗体IgG的浓度。2.使用16SrDNA高通量测序检测小鼠肠道菌群的组成情

况。3.使用液相色谱-质谱联用技术的方法检测小鼠肠道菌群代谢产物。4.使用

粪菌移植的方法将幼年健康小鼠粪便或抗生素混合物干预过的幼年小鼠粪便移植

给已由抗生素混合物干预过肠道菌群的幼年小鼠，注射乙肝疫苗后用ELISA技术

III

浙江大学博士学位论文中文摘要

检测小鼠血浆中乙肝表面抗体IgG、IgG1和IgG2a浓度。5.流式细胞技术检测小

鼠外周血和脾脏中浆细胞、浆母细胞和生发中心B细胞（GerminalcenterBcell，

GCB）的比例。

结果：

实验结果表明：1.幼年小鼠经抗生素混合物干预肠道菌群后，其对乙肝疫苗

的应答能力下降；而成年鼠经抗生素混合物干预肠道菌群后，其对乙肝疫苗的应

答能力不受影响。2.使用抗生素混合物导致幼年小鼠肠道菌群组成发生了明显改

变，门水平上，厚壁菌门、变形菌门和放线菌门相对丰度降低，拟杆菌门和螺旋

体菌门相对丰度升高；属水平上，乳酸杆菌属的相对丰度明显降低。3.抗生素混

合物干预导致幼年小鼠粪便内代谢产物总数减少，检测到差异代谢产物包括维生

素、氨基酸、脂肪酸等。经KEGG功能注释后发现差异代谢产物涉及的代谢途径

主要包括辅助分子和维生素代谢、氨基酸代谢和能量代谢等。4.通过粪菌移植重

建肠道菌群后，小鼠受损的乙肝疫苗应答能力恢复，血浆中乙肝表面抗体IgG、

IgG1和IgG2a浓度均升高。5.粪菌移植重建肠道菌群后，因抗生素混合物干预引