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细胞培养实验数据分析面试题

一、单选题（每题2分，共10题）

1.在进行细胞增殖实验时，MTT法与CCK-8法的主要区别是什么？

A.MTT法需要酶解，CCK-8法不需要

B.MTT法适用于贴壁细胞，CCK-8法适用于悬浮细胞

C.MTT法检测原理基于甲臜还原，CCK-8法基于水溶性四唑盐

D.MTT法成本更低，CCK-8法操作更复杂

2.细胞凋亡检测中，AnnexinV-FITC/PI双染法主要用于区分哪些细胞状态？

A.活细胞与死细胞

B.早凋亡细胞与晚凋亡细胞

C.增殖细胞与静止细胞

D.正常细胞与肿瘤细胞

3.在WesternBlot实验中，若条带出现拖尾现象，可能的原因是？

A.抗体浓度过高

B.蛋白质过载

C.电转移时间过长

D.样品制备不均一

4.细胞迁移实验（如划痕实验）中，计算迁移距离时通常采用哪些区域？

A.划痕前区域

B.划痕后区域

C.划痕前与划痕后区域的差值

D.细胞密集区域

5.流式细胞术检测细胞周期时，G0/G1期细胞的主要特征是？

A.DNA含量最低

B.DNA含量最高

C.碱性磷酸酶阳性

D.细胞表面标记阳性

二、多选题（每题3分，共5题）

6.影响细胞培养数据重复性的因素包括哪些？

A.细胞批次差异

B.试剂纯度

C.操作者技术水平

D.实验环境温度

E.数据分析方法

7.在进行细胞毒性实验时，哪些指标可用于评估细胞损伤？

A.MTT吸光度值

B.LDH释放率

C.细胞计数

D.AnnexinV阳性率

E.WesternBlot条带强度

8.细胞分化实验中，常用的检测方法包括哪些？

A.流式细胞术检测表面标记

B.WesternBlot检测分化相关蛋白

C.形态学观察

D.qPCR检测基因表达

E.细胞染色（如油红O染色）

9.实验设计中，哪些属于对照组设置？

A.空白对照组

B.阳性对照组

C.阴性对照组

D.自身对照组

E.随机对照组

10.细胞衰老检测中，哪些标志物常被用于评估？

A.β-半乳糖苷酶活性

B.端粒长度

C.p16表达水平

D.SOD活性

E.细胞活力

三、简答题（每题5分，共4题）

11.简述MTT实验的原理及其适用范围。

12.解释流式细胞术检测细胞凋亡的原理，并说明常用参数。

13.描述WesternBlot实验中，如何提高蛋白条带重复性。

14.说明细胞划痕实验的步骤及数据分析方法。

四、计算题（每题8分，共2题）

15.某细胞增殖实验中，实验组与对照组的MTT吸光度值分别为0.45和0.25。计算实验组的细胞增殖率（%），并说明结果的意义。

16.在细胞迁移实验中，划痕后6小时，划痕宽度从2mm减小到1mm。计算细胞迁移距离，并分析可能的影响因素。

五、论述题（每题10分，共2题）

17.论述细胞培养实验数据重复性差的可能原因及改进措施。

18.结合实际案例，分析如何优化细胞毒性实验设计以提高结果的可靠性。

答案与解析

一、单选题

1.C

解析：MTT法检测原理基于细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶将MTT还原为甲臘，而CCK-8法使用水溶性四唑盐，无需酶解步骤。

2.B

解析：AnnexinV-FITC结合凋亡早期细胞膜磷脂酰丝氨酸暴露的位点，PI用于区分死细胞，双染可区分早凋亡（FITC+PI-）、晚凋亡（FITC+PI+）及活细胞（FITC-PI-）。

3.C

解析：电转移时间过长可能导致蛋白条带弥散，表现为拖尾现象。其他选项中，抗体过高可能导致非特异性结合，过载可能导致信号饱和，样品不均一影响条带一致性。

4.C

解析：迁移距离计算需对比划痕前后的宽度差值，即（划痕前宽度-划痕后宽度）。其他区域无法准确反映迁移情况。

5.A

解析：G0/G1期细胞完成DNA复制但未进入有丝分裂，DNA含量最低（2n）。其他选项中，B为G2/M期特征；C/D为功能或标记特征，与周期无关。

二、多选题

6.A、B、C、D

解析：细胞批次、试剂纯度、操作者水平及环境温度均影响实验重复性。数据分析方法属于后处理环节，非直接影响因素。

7.A、B、C、D

解析：MTT吸光度反映活细胞数量；LDH释放率检测细胞膜损伤；细胞计数直接反映细胞活力；AnnexinV阳性率评估凋亡程度。WesternBlot条带强度更多反映蛋白表达水平，与毒性关联性较弱。

8.A、B、C、D、E

解析：分化检测需综合形态学、蛋白表达、基因表达及染色结果。流式表面标记、WesternBlot蛋白、形态学观察、qPCR基因及油红O染色均为常用方法。

9.A、B、C、D

解析：实验设计需设置空白、阳性、阴性及自身