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专题5与蛋白质技术
课题5.1的粗提取与鉴定
一、【课题目标】
(一)知识与技能
1、通过尝试对植物或动物组织中的进行粗提取,了解的化学性质。
2、理解粗提取与鉴定的原理
(二)过程与方法
掌握如提取计数,能利用的性质进行实验设计和操作
(三)、态度与价值观
通过对的粗提取的实验过程的设计及操作,锻炼科学的思维方法,培养实事求是的科学态度。
二、【课题重点】
的粗提取和鉴定方法
三、【课题难点】
的粗提取和鉴定方法
四、【教学方法】
启发式教学
五、【】
多课件
六、【教学过程】
(一)引入新课
无论是果胶酶还是加酶洗衣粉中的酶制剂,都是从细胞中提取出来的。从今天开始,我们学习生物化
学成分的提取与改造技术。
(二)进行新课
1.基础知识
1.1粗提取的原理
提取的原理包括的溶解性和耐受性两个方面。问:提取的溶解性原理包括哪些方面?
在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;不溶于。
1.1.1分析图5-1。在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点?要使溶解,需要使用什么浓
度?要使析出,又需要使用什么浓度?
在0.14mol/L时溶解度最小;较高浓度可使溶解;0.14mol/L可使析出。
1.1.2在溶解细胞中的时,人们通常选用2mol/LNaCl溶液;将分子析出的方法是向溶有
的NaCl溶液中缓慢注入蒸馏水,以稀释NaCl溶液。是一种常用,但却不能溶于
(特别是95%冷却),但细胞中蛋白质可溶于。问:采用不溶于的原理,可以达到什么
目的?
将和蛋白质进一步分离。
1.1.3提取还可以利用对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。利用该原理时,应选用怎样的酶
和怎样的温度值?
蛋白酶,因为酶具有专一性,蛋白酶只水解蛋白质而不会对产生影响。温度值为60~80℃,因为
该温度值蛋白质变性沉淀,而不会变性。
补充:的变性是指分子在高温下解螺旋,其温度在80℃以上,如在PCR技术中变性温度
在95℃。
思考:观察图5-2,洗涤剂在提取中有何作用?
洗涤剂将细胞膜上的蛋白质,从而细胞膜。
1.2的鉴定原理
当鉴定提取出的物质是否是时,需要使用什么指示剂进行鉴定?
在沸水浴条件下,遇二苯胺呈现蓝色。
原理总结。通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出,可以从细胞中提取和提纯;再利用
进一步将与蛋白质分离开来,达到提纯的目的;最后利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是。
2.实验设计
2.1实验材料
2.1.1不同生物的组织中含量不同。在选取材料时,应本着含量高、材料易得、便于提取的
原则。你认为的材料中哪些不适合提取?
哺乳动物的血液和液体培养基中的大肠杆菌。
2.1.2从核数目来看,猪38条,鸡78条,哺乳动物血0条,猕猴桃58条,洋葱16条,豌豆14
条,菠菜12条,大肠杆菌1条。请选择动植物材料各一种。
鸡血、猕猴桃。
2.2破碎细胞,获取含的滤液
若选用鸡血和洋葱作实验材料,则怎样获取含的滤液?
在鸡血细胞液中
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