载荷槲皮素的糖基化酪蛋白纳米粒子的制备、表征及性能研究.pdfVIP

析显示糖基化产物的α-螺旋和β-折叠含量增加、无规卷曲含量下降；荧光光谱

结果表明壳寡糖的接入会对其内源荧光基团产生一定的屏蔽作用，最大荧光强度

2

降低；表面疏水性指数为879，增加了320；乳化活性为53.29m/g，下降了11.88

2

m/g；乳化稳定性为46.95%，上升了5.68%。

（2）采用超声自组装法，制备Cas、Cas-Cos空载纳米粒子（分别为-Cas、-

nn

Cas-Cos）。首先，以平均粒径（DZ）和分散系数（PDI）为指标，考察蛋白质浓

度、超声功率、pH对DZ和PDI的影响，从而确定空载纳米粒子的最佳制备工

艺；其次，对空载纳米粒子的冻融稳定性、贮藏稳定性进行分析。结果表明：当

Cas和Cas-Cos的蛋白浓度分别为4g/L，超声功率为200w、溶液的pH为5.8时，

-Cas和-Cas-Cos的D最小，分别为169.1nm、125.6nm；PDI分别为0.217、

nnZ

0.161；冻融稳定性和贮藏稳定性结果表明-Cas、-Cas-Cos均具有良好的稳定性。

nn

（3）以Que为研究对象，利用-Cas和-Cas-Cos包埋Que，并对其包埋率

nn

（EE）、荷载能力（LC）、DZ、PDI和结构特性进行表征。结果表明：当蛋白质

与Que的质量比为40:1时，包埋率分别为74.14%、85.21%；荷载能力分别为

1.85%、2.13%；DZ分别为183.2nm、137.6nm；PDI分别为0.257、0.177；FTIR

表明Que已经成功包埋进纳空载纳米粒子的疏水性内核中，且通过氢键、疏水作

用等作用力与蛋白质相结合；X射线衍射（XRD）表明Que以非晶态的形式分

散在蛋白质中；差示扫描量热分析（DSC）和热重分析（TG）分析均表明酪蛋白

糖基化后，其热稳定性增强，且-Cas-Cos对Que有着更好的保护效果；透射电

n

镜结果空载纳米粒子呈球形，负载Que前后，粒子的形状无明显变化。

（4）以负载Que的酪蛋白纳米粒子（-Cas-Que）、酪蛋白-壳寡糖纳米粒子（-

nn

Cas-Cos-Que）为研究对象，对两种纳米粒子的贮藏稳定性、热稳定性、体外抗消

化性、生物可及度、抗氧化性、对人前列腺癌PC-3细胞的抑制效果进行评估。

结果表明：两种纳米粒子能增强Que在贮藏过程（条件分别为4℃避光、25℃避

光、25℃自然光）中的稳定性且-Cas-Cos-Que对Que的保护效果要优于-Cas-

nn

Que；热稳定性结果表明在不同的加热温度（37℃、60℃、99℃）下，-Cas-Cos-

n

Que对槲皮素的保护效果最好；体外抗消化结果显示，-Cas-Cos-Que具有更好

n

的抗消化效果，有利于保障目标物在人体消化道中的结构稳定且两种纳米粒子均

在一定程度上提高了Que的生物可及度（增加了1.72~3.83倍）；抗氧化性结果

显示槲皮素乙醇溶液（Que-乙醇）对DPPH和ABTS