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2025年大学《生物育种科学-分子生物学技术》考试备考题库及答案解析

单位所属部门：________姓名：________考场号：________考生号：________

一、选择题

1.DNA聚合酶在PCR反应中起关键作用，其主要功能是（）

A.合成RNA链

B.延伸DNA链

C.切割DNA链

D.修复DNA损伤

答案：B

解析：DNA聚合酶是PCR反应的核心酶，能够利用dNTP为原料，以模板DNA为引导，合成新的DNA链。其主要功能是在引物的作用下，沿着模板链延伸DNA链。RNA聚合酶合成RNA链，限制性内切酶切割DNA链，DNA修复酶负责修复DNA损伤。

2.在基因克隆过程中，为了使外源DNA片段与载体连接，通常需要使用（）

A.DNA连接酶

B.DNA聚合酶

C.限制性内切酶

D.RNA聚合酶

答案：A

解析：基因克隆过程中，需要将外源DNA片段与载体连接形成重组DNA分子，这个过程中需要DNA连接酶的作用。DNA连接酶能够识别DNA双链的黏性末端或平末端，并催化磷酸二酯键的形成，使DNA片段连接起来。限制性内切酶用于切割DNA，DNA聚合酶用于合成DNA，RNA聚合酶用于合成RNA。

3.PCR技术中，引物的作用是（）

A.切割DNA

B.合成RNA

C.模板延伸

D.特异性识别模板序列

答案：D

解析：PCR反应中，引物是短链的单链DNA或RNA，它能特异性地结合到模板DNA的互补序列上，作为DNA聚合酶合成新链的起始点。引物的特异性决定了PCR扩增的特异性，即只扩增目标DNA片段。限制性内切酶切割DNA，RNA聚合酶合成RNA，DNA聚合酶延伸DNA链。

4.下列哪种方法常用于检测基因表达产物（）

A.凝胶电泳

B.聚合酶链式反应

C.免疫印迹

D.DNA测序

答案：C

解析：基因表达产物主要是蛋白质，检测蛋白质常用免疫学方法，如免疫印迹（WesternBlotting）技术，利用抗体特异性识别目标蛋白，并在膜上进行检测。凝胶电泳用于分离核酸或蛋白质，PCR用于扩增DNA，DNA测序用于确定DNA序列。

5.在分子克隆中，用于筛选含有重组质粒的宿主细胞，通常采用（）

A.抗生素抗性

B.发光反应

C.蓝白斑筛选

D.DNA测序

答案：C

解析：在分子克隆中，常用抗生素抗性基因作为标记基因，将含有重组质粒的宿主细胞与不含质粒的细胞进行区分。蓝白斑筛选是利用α-互补作用，含有野生型质粒的宿主细胞能产生蓝色菌落，而含有重组质粒的宿主细胞产生无色菌落，从而进行筛选。发光反应和DNA测序也可用于筛选，但蓝白斑筛选是常用且简便的方法。

6.下列哪种酶能够识别并切割DNA的特定位点（）

A.DNA聚合酶

B.RNA聚合酶

C.DNA连接酶

D.限制性内切酶

答案：D

解析：限制性内切酶能够识别DNA分子中特定的核苷酸序列（识别位点），并在识别位点或其附近切割DNA双链。DNA聚合酶合成DNA，RNA聚合酶合成RNA，DNA连接酶连接DNA片段。这些酶在分子生物学中都有重要作用，但只有限制性内切酶具有特异性切割DNA序列的能力。

7.在基因编辑技术中，CRISPR/Cas9系统的主要组成部分是（）

A.DNA聚合酶和限制性内切酶

B.RNA引物和DNA连接酶

C.Cas9核酸酶和向导RNA

D.RNA聚合酶和DNA修复酶

答案：C

解析：CRISPR/Cas9基因编辑系统是由两部分组成的，一是Cas9核酸酶，能够切割DNA双链；二是向导RNA（gRNA），能够特异性识别目标DNA序列，并将Cas9核酸酶引导到目标位点进行切割。其他选项中的酶在DNA复制、转录和修复中发挥作用，但与CRISPR/Cas9系统无关。

8.下列哪种方法常用于分离和纯化蛋白质（）

A.凝胶电泳

B.聚合酶链式反应

C.免疫印迹

D.毛细管电泳

答案：A

解析：凝胶电泳是分离和纯化蛋白质的常用方法，根据蛋白质分子的大小、电荷和疏水性等特性，在凝胶基质中进行分离。其他方法如免疫印迹用于检测蛋白质，PCR用于扩增DNA，毛细管电泳用于分离小分子物质或DNA片段。

9.在RNA干扰（RNAi）过程中，起关键作用的分子是（）

A.mRNA

B.siRNA

C.miRNA

D.tRNA

答案：B

解析：RNA干扰（RNAi）是生物体内一种重要的基因调控机制，通过小干扰RNA（siRNA）或微RNA（miRNA）等小分子RNA抑制目标基因的表达。siRNA是双链RNA，能在RNA干扰过程中切割mRNA，导致目标基因的沉默。mRNA是蛋白质合成的模板，miRNA通过不完全互补结合mRNA来抑制翻译或促进降解，tRNA是转运氨基酸的载体。

10.下列哪种技术常用于测定DNA序列（