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第八章糖基转移酶和糖苷酶;第一节糖基转移酶(Glycosyltransferases);第3页,共118页。;第4页,共118页。;第82页,共118页。
A3r菌所产酶液能较好的水解黄芪总皂苷中糖基较多的皂苷,进而生成糖基较少的皂苷。
第41页,共118页。
因?-2,3NeuAcT不能以?-1,3岩藻糖化糖链为底物。
糖基转移酶的表达和细胞周期密切相关。
被酶水解打开的糖苷键必须是?-1,4连接。
GnT-Ⅳ和GnT-Ⅴ能将一个N-乙酰葡糖胺转移至N-糖链五糖核心1,3和1,6臂甘露糖上,分别形成?-1,4和1,6键,使N-糖链天线数增多,?-1,6FucT则将岩藻糖转移至糖链最内侧(与天冬酰胺相邻)的N-乙酰葡糖胺上形成核心岩藻糖。
它能诱导抗体产生,从而也会出现自身免疫,其症状是类风湿。
第15页,共118页。
甜菊糖基转移酶基因的克隆及序列分析
有少数糖基转移酶是I型膜结合蛋白,其较短的N-端在内质网腔,而很长的C-端则定位于胞浆。
?-N-乙酰半乳糖胺内切酶能够切开这个连键,把0-型糖链和肽链完全分开。
如半乳糖转移酶,唾液酸转移酶等。
四、糖苷酶的生物学功能
乙醇沉淀、凝胶过滤、离子交换;糖基转移酶的命名;GnT-Ⅳ和GnT-Ⅴ能将一个N-乙酰葡糖胺转移至N-糖链五糖核心1,3和1,6臂甘露糖上,分别形成?-1,4和1,6键,使N-糖链天线数增多,?-1,6FucT则将岩藻糖转移至糖链最内侧(与天冬酰胺相邻)的N-乙酰葡糖胺上形成核心岩藻糖。
TheEvolutionaryHistoryofGlycosyltransferaseGenes
第90页,共118页。
这种分类法糖基转移酶被分为66个家族及一个未分类族。
以甜菊基因组DNA为模板,PCR扩增获得甜菊糖基转移酶基因片段。
HDS-KLH,HDS,GTF免疫组大鼠龋Keyes计分均低于对照组(P0101),光滑面防龋效果最为显著。
多聚N-乙酰半乳糖胺链的出现被看成是肿瘤的重要标志。
(3)indo-H的底物专一性,在糖基一例要求一个四糖结构:
携带人OGTcDNA的PET32a质粒在大肠杆菌中表达出带有1个S-Tag的重组人OGT融合蛋白,然后用与S-蛋白质偶联的琼脂糖凝胶颗粒从细菌裂解液中亲和层析纯化得到OGT融合蛋白。
一是测定糖苷酶作用下从非还原端释放的单糖。
糖链的合成不是由基因编码合成的,而是由基因编码的糖基转移酶通过糖基化作用,将糖基由其供体转移到受体上完成的。
在哺乳动物中,血清、血细胞、体液、各种组织器官中都有存在。;FucosyltransferaseFamily;Allmembersofthesialyltransferasegenescloned;TheEvolutionaryHistoryofGlycosyltransferaseGenes;二、糖基转移酶特性;糖基转移酶特性;BiologicalFunctionsofaSolubleFormof
N-acetylglucosaminyltransferaseV(GnT-V);RegulationofHighBranching
inN-linkedOligosaccharides;第15页,共118页。;大鼠不同组织中三种N-乙酰葡糖胺基转移酶(GlcNAcT);三、糖基转移酶的结构域;糖基转移酶的结构域;克隆的哺乳动物糖基转移酶的结构域;四、糖基转移酶的催化特性与功能;糖基转移酶的催化特性;不同的糖基转移酶所催化的糖基转移反应不同;人B血型的?1-3半乳糖基转移酶对受体底物的专一性;糖基转移酶的催化特性;糖基转移酶的催化特性;糖基转移酶的催化特性;五、糖基转移酶同源性和抗原性;糖基转移酶同源性和抗原性;六、糖基转移酶和疾病;糖基转移酶和疾病;糖基转移酶和疾病;糖基转移酶和疾病;糖基转移酶和疾病;七、糖基转移酶的应用;糖基转移酶的应用;糖基转移酶在糖类合成中的应用
糖类药物在治疗炎症、用作肿瘤疫苗和抗病毒等方面都有其独特的功效。
现在普遍使用的糖类合成方法有两种:
化学合成和酶促合成
化学合成近年来取得一些进展,提出了一种全自动寡糖合成法,但在天然复合产物中以一种糖代替另一种糖仍然困难。
酶促合成的产量高、产物具有特异立体化学异构性。;糖基转移酶的应用;八、O-GlcNAc糖基转移酶在原核
和真核细胞中的表达和提纯;细胞质和细胞核内的蛋白质O-GlcNAc糖基化和去糖基化分别由O-GlcNAc糖基转移酶(OGT)和O-GlcNAc糖苷酶催化。
蛋白质的O-GlcNAc糖基化修饰及其生物学意义目前成了蛋白质翻译后修饰领域最热门的课题之一
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