血红蛋白测定实验指导.pptxVIP

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任务四血红蛋白的测定

一、原理

二、器材与试剂

三、测定方法

四、注意事项

五、正常参考值

六、临床意义

一、原理

血液与0.1mol/L盐酸作用后,血红蛋白变为棕色酸性血红蛋白,与标准比色柱比色,求出每100ml血液中所含血红蛋白的百分数或质量(g)。

二、器材与试剂

1.仪器:沙利氏血红蛋白计[比色架、标准比色柱、血红蛋白测定管、沙利氏吸管(也称为血红蛋白吸管,上面有两个刻度,分别为10L和20L,专门用于吸取定量血液)。测定管上有两种刻度,从下往上,一侧有2~24的刻度,表示100mL血液中所含血红蛋白的质量(g);另一侧有20~140的刻度,表示100mL血液中血红蛋白的百分数。另外还需小玻璃棒、滴管、脱脂棉等。

2.试剂:0.1molL盐酸、蒸馏水、乙醇、乙醚。

三、测定方法

1.于测定管内加入0.1mol/L盐酸至“2”或百分刻度“20”处。

2.用沙利氏吸管吸取被检血液至“20uL"刻度处,并用棉球拭去管外壁血液,迅速将管内血液缓缓吹入测定管内的盐酸底部;再吸取上清液,反复吹吸数次,以洗出沙利氏吸管内黏附的血液。

3.混匀,将测定管插入比色架内,静置10min。

4.沿管壁加入蒸馏水或0.1mol/L盐酸,边加边摇匀,逐步稀释直到与标准比色柱的色调一致为止,读取测定管内液柱四面的刻度值,即为100mL血液中血红蛋白的质量(g)或百分数。

三、测定方法

四、注意事项

1、为减少误差,向测定管内的盐酸中加入血液时要避免气泡产生,如果有气泡产生,可用小玻棒少量95%酒精,然后接触气泡,即可消除。

2、为使结果更为准确,在读数后再加蒸馏水1滴,如液体色泽变淡,以上一次读数为准;如液体色泽不变淡,则需重新读数,以后一次读数为准

五、正常参考值

动物血红蛋白含量正常参考值见表

动物种类

血红蛋白(g/100ml)

动物种类

血红蛋白(g/100ml)

黄牛

9.55±1.0

14.9(12.0-18.0)

水牛

12.3±1.66

12.0(8.0-15.0)

奶牛

8.37±0.7

12.77±2.05

绵羊

7.2±1.27

12.74±2.18

奶山羊

8.33±0.75

10.99±3.02

11.16±1.42

骆驼

11.8±1.03

六、临床意义

常见于固机体脱水而血液浓缩的各种疾病,如腹泻、剧烈呕吐、大出汗、多尿等,也见于肠便秘、胃阻塞及某些中毒病:真性红细胞增多以及心肺疾病时,由于代偿作用所致的红细胞增多,血红蛋白含量也相应增高。

1.血红蛋白含量增高

六、临床意义

见于各种贫血、血孢子虫病、急性钩端螺旋体病、胃肠道寄生虫病及中毒病。

2.血红蛋白含量降低

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