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任务二血清钾测定
一、原理
二、材料与设备
三、操作过程与方法
四、计算
五、注意事项
六、判定标准
七、临床意义
一、原理
血清中钾离子与四苯硼钠作用,形成不溶于水的四苯硼钾,产生的浊度与钾离子的浓度成正比,故根据浊度可测得血清中钾的含量。
二、材料与设备
分光光度计,离心机,刻度吸管等。
(一)仪器
二、材料与设备
1.缓冲液
(1)0.2mol/L磷酸氢二钠溶液,称取磷酸氢二钠7.16g,溶于100.0ml蒸馏水中。
(2)0.1mol/L枸橼酸溶液枸椽酸2.1g,溶于100.0ml蒸馏水中。应用时取(1)液19.45ml,加(2)液0.55ml混合而成。
(二)试剂
二、材料与设备
2.1%四苯硼钠溶液
称取四苯硼钠1.0g,溶于20ml缓冲液中,加重蒸馏水至100.0ml。
(二)试剂
二、材料与设备
3.钾贮存标准液(1ml=2mg钾)
精确称取干燥硫酸钾0.446g,置于100.0ml容量瓶中,用重蒸馏水溶解并稀释至刻度。
(二)试剂
二、材料与设备
4.钾应用标准液(1ml=0.02mg钾)
吸取钾贮存标准液1ml,置于100.0ml容量瓶中,以重蒸馏水加至刻度。
(二)试剂
三、操作过程与方法
1.在血清0.2ml中加入重蒸馏水1.4ml,10%钨酸钠溶液0.2ml及1/3mol/L硫酸溶液0.2ml,混匀。离心沉淀,取得上清液,按表12-2操作。
三、操作过程与方法
步骤
空白管
标准管
测定管
无蛋白上清液
1.0
-
-
钾应用标准液
-
1.0
-
重蒸馏水
-
-
1.0
1%四苯硼钠
4.0
4.0
4.0
混匀,5min后用250nm滤光板进行光电比色,以空白管校正光密度到“0”点,分别读取各管读数。
四、计算
血清钾(mg/dl)=
单位转换:(血清钾)mmol/L=mg/dl×0.02558
五、注意事项
1.红细胞内的钾离子比血清内的含量高约20倍,因此,血清不能稍有溶血,否则会导致很大的误差,采血后趁血液未凝固之前,离心将红细胞除掉,待血浆凝固,分离血清。
2.四苯硼钠的质量直接影响检验结果,应选择外观洁白,溶解度高,溶解后溶液清晰者。溶液最好经常更新。
六、判定标准
动物种类
血清钾(K+)
血清钠(Na+)
牛
4.60(4.09~5.88)
154.43(141.38~165.30)
马
3.33(2.81~3.58)
148.77(145.73~152.25)
猪
5.88(4.86~5.88)
154.43(141.38~160.95)
狗
4.60(3.84~4.86)
156.60(147.90~165.30)
猫
3.07(2.81~4.09)
154.86(143.55~169.65)
家兔
4.09(2.81~5.12)
157.91(152.25~163.13)
七、临床意义
动物体内绝大部分钾存在于细胞内,为维持细胞活动的重要阳离子。细胞哦外液中一定浓度的钾盐含量,是维持肌肉神经的正常功能所必须。钾盐由长度吸收,约90%由尿液排出体外。某些疾病可因钾摄入过少或排出过多,或排出障碍使钾盐潴积,或在体内分布失常而形成血钾增高或减低。
七、临床意义
1.血清钾增高:在肾上腺机能不全、肠阻塞、尿毒症及注射肾上腺素之后,血清钾含量增高。
2.血清钾减低:酸中度、昏迷、呕吐、腹泻、大手术后或因钾盐不足等,均可引起血清钾减低。
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