血清钾测定实验操作指南.pptxVIP

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任务二血清钾测定

一、原理

二、材料与设备

三、操作过程与方法

四、计算

五、注意事项

六、判定标准

七、临床意义

一、原理

血清中钾离子与四苯硼钠作用,形成不溶于水的四苯硼钾,产生的浊度与钾离子的浓度成正比,故根据浊度可测得血清中钾的含量。

二、材料与设备

分光光度计,离心机,刻度吸管等。

(一)仪器

二、材料与设备

1.缓冲液

(1)0.2mol/L磷酸氢二钠溶液,称取磷酸氢二钠7.16g,溶于100.0ml蒸馏水中。

(2)0.1mol/L枸橼酸溶液枸椽酸2.1g,溶于100.0ml蒸馏水中。应用时取(1)液19.45ml,加(2)液0.55ml混合而成。

(二)试剂

二、材料与设备

2.1%四苯硼钠溶液

称取四苯硼钠1.0g,溶于20ml缓冲液中,加重蒸馏水至100.0ml。

(二)试剂

二、材料与设备

3.钾贮存标准液(1ml=2mg钾)

精确称取干燥硫酸钾0.446g,置于100.0ml容量瓶中,用重蒸馏水溶解并稀释至刻度。

(二)试剂

二、材料与设备

4.钾应用标准液(1ml=0.02mg钾)

吸取钾贮存标准液1ml,置于100.0ml容量瓶中,以重蒸馏水加至刻度。

(二)试剂

三、操作过程与方法

1.在血清0.2ml中加入重蒸馏水1.4ml,10%钨酸钠溶液0.2ml及1/3mol/L硫酸溶液0.2ml,混匀。离心沉淀,取得上清液,按表12-2操作。

三、操作过程与方法

步骤

空白管

标准管

测定管

无蛋白上清液

1.0

-

-

钾应用标准液

-

1.0

-

重蒸馏水

-

-

1.0

1%四苯硼钠

4.0

4.0

4.0

混匀,5min后用250nm滤光板进行光电比色,以空白管校正光密度到“0”点,分别读取各管读数。

四、计算

血清钾(mg/dl)=

单位转换:(血清钾)mmol/L=mg/dl×0.02558

五、注意事项

1.红细胞内的钾离子比血清内的含量高约20倍,因此,血清不能稍有溶血,否则会导致很大的误差,采血后趁血液未凝固之前,离心将红细胞除掉,待血浆凝固,分离血清。

2.四苯硼钠的质量直接影响检验结果,应选择外观洁白,溶解度高,溶解后溶液清晰者。溶液最好经常更新。

六、判定标准

动物种类

血清钾(K+)

血清钠(Na+)

4.60(4.09~5.88)

154.43(141.38~165.30)

3.33(2.81~3.58)

148.77(145.73~152.25)

5.88(4.86~5.88)

154.43(141.38~160.95)

4.60(3.84~4.86)

156.60(147.90~165.30)

3.07(2.81~4.09)

154.86(143.55~169.65)

家兔

4.09(2.81~5.12)

157.91(152.25~163.13)

七、临床意义

动物体内绝大部分钾存在于细胞内,为维持细胞活动的重要阳离子。细胞哦外液中一定浓度的钾盐含量,是维持肌肉神经的正常功能所必须。钾盐由长度吸收,约90%由尿液排出体外。某些疾病可因钾摄入过少或排出过多,或排出障碍使钾盐潴积,或在体内分布失常而形成血钾增高或减低。

七、临床意义

1.血清钾增高:在肾上腺机能不全、肠阻塞、尿毒症及注射肾上腺素之后,血清钾含量增高。

2.血清钾减低:酸中度、昏迷、呕吐、腹泻、大手术后或因钾盐不足等,均可引起血清钾减低。

谢谢聆听!

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