免疫沉淀试验方法与应用.pptxVIP

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沉淀试验;二、沉淀试验;(一)环状沉淀试验

在小试管中加入抗血清+缓慢加入待测抗原?(数分钟)

结果:阳性—白色沉淀环;阴性—无

(二)絮状沉淀试验

将已知抗体与待测抗原混匀于试管或凹玻片?

结果:阳性—絮状沉淀;阴性—无;(三)琼脂扩散试验;;(四)免疫电泳

1、对流免疫电泳

为在双向琼脂扩散的基础上进行电泳的方法。将琼脂板置于电泳槽内,在负极端孔内加抗原,正极端孔内加抗体,然后通电。抗原在pH8.6的缓冲液中带负电荷,故向正极移动;抗体为大分子球蛋白,移动慢,并受琼脂电渗影响由正极向负极移动,在两者相遇的合适比例处出现白色沉淀线。

该法使抗原抗体相向而行,提高了敏感性,缺点是多组抗原抗体存在时沉淀线易重叠在一起,缺乏分辨力。;将双向单扩散与电泳技术结合起来,其沉淀线似火箭,故名火箭电泳。

;三、补体结合试验;(一)补体结合试验原理

1)补体可与任何抗原抗体复合物相结合;

2)指示系统遇补体后就出现明显的溶血反应

(二)组成

有2个系统共5种成分

1)检测系统(溶菌系统):

包括已知抗体(或抗原)和待测抗原(或抗体)

2)指示系统(溶血系统):

包括绵羊红细胞和溶血素(绵羊红细胞的特异性抗体)

3)补体:取自豚鼠的新鲜血清;操作过程和结果

1)阳性反应:+补体

抗原(体)+待测抗体(原)?抗原抗体复合物抗原抗体和补体复合物

+指示系统(绵羊红细胞和溶血素复合物)

结果:(因此时无游离的补体与指示系统结合)不发生溶血

2)阴性反应:+补体

抗原(体)+待测抗体(原)?抗原+抗体抗原+抗体+补体(游离)

+指示系统(绵羊红细胞和溶血素复合物)

发生溶血绵羊红细胞、溶血素及补体复合物;(三)补体结合试验的应用

马传染性贫血、鼻疽及钩端螺旋体病的诊断及口蹄疫病毒等抗原的定型。

分为全量法、半量法、半微量法、微量法。

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