2026版《金版教程》高考总复习生物不定项版终新第九单元 微专题9 PCR技术及电泳相关问题.pptxVIP

;1．(2024·云南昆明阶段练习)流感病毒是一类单链RNA病毒，临床上可以通过RT－PCR技术进行病毒定量检测。其原理是先利用病毒RNA逆转录出互补DNA，再利用PCR技术扩增相应的DNA片段，根据检测结果判断被检测者是否感染。下列叙述错误的是()

A．PCR所用的试剂盒通常应含有解旋酶、TaqDNA聚合酶、四种脱氧核苷酸等

B．PCR所用的引物能与模板的3′端特异性结合

C．PCR过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是复性

D．可采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物;解析：RT－PCR过程需要逆转录酶和耐高温的DNA聚合酶，DNA解旋过程不需要解旋酶参与，反应过程中高温即可解旋，A错误；PCR所用的引物能与模板的3′端特异性结合，B正确；PCR过程每次循环分为3步，变性→复性→延伸，其中温度最低的一步是复性，C正确；可采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物，D正确。;2．(2022·辽宁，12)抗虫和耐除草剂玉米双抗12-5是我国自主研发的转基因品种。为给监管转基因生物安全提供依据，采用PCR方法进行目的基因监测，反应程序如图所示。下列叙述正确的是()

A．预变性过程可促进模板DNA边解旋边复制

B．后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分

C．延伸过程无需引物参与即可完成半保留复制

D．转基因品种经检测含有目的基因后即可上市;解析：预变性的温度为94℃，在这个温度下，

双链DNA解旋为单链，但模板链不易和引物结合，

不能进行复制，A错误；延伸的目的是合成新的子

链，后延伸延长了延伸时间，使目的基因的扩增更加充分，B正确；延伸过程需要引物与模板链结合，使DNA聚合酶在引物的3′端加上相应的脱氧核苷酸，C错误；转基因品种经检测含有目的基因且已经表达使生物体表现出相应性状后，还需要经过系列的安全性评价，符合相应标准后才能上市，D错误。;3．常规PCR只能扩增两引物间的DNA区段，

要扩增已知DNA序列两侧的未知DNA序列，可用

反向PCR技术。反向PCR技术扩增的原理如图所示。

下列叙述错误的是()

A．酶切阶段，L中不能含有酶切时所选限制酶的识别序列

B．环化阶段，可选用E.coliDNA连接酶或T4DNA连接酶

C．图中引物，应选择引物1和引物4，且二者间不能互补配对

D．PCR扩增，每轮循环前应加入限制酶将环状DNA切割成线状;解析：在酶切阶段，已知序列L中不能含有

酶切时所选限制酶的识别序列，不然会将已知序

列L切断，造成序列识别混乱，A正确；T4DNA

连接酶与E.coliDNA连接酶都可以用来连接黏性

末端，因此环化阶段，可选用E.coliDNA连接酶或T4DNA连接酶，B正确；PCR过程需要两种引物，能分别与目的基因两条链的3′端通过碱基互补配对结合，为保证延伸的是已知序列两侧的未知序列，应该选择引物1和引物4，且二者间不能互补配对，C正确；PCR的扩增只需要第一次循环前加入足够的限制酶，并不需要每轮都加入，D错误。;4.(2024·全国专题练习)用A和B两种限制酶同时处理同

一DNA片段，限制酶对应切点一定能切开。若用PCR技术

扩增切下的片段X，下列关于PCR技术的叙述错误的是()

A．设计引物从图中完整DNA片段中扩增出完整X，至少需要3次PCR

B．将该DNA片段循环n次，共需2n－2个引物

C．理论上第4轮循环产物中含两种引物的DNA片段占7/8

D．理论上第n次复制时，共需2n个引物;解析：按照半保留复制过程直接画图可知，至少需要

3次PCR才能得到完整的X(画图时注意区分出不同长度的

DNA链)，A正确；DNA分子复制后产生的子代DNA分子中，只有原来的两条DNA链不含有引物，子代DNA分子数为2n，DNA链数为2n＋1，故将该DNA片段循环n次，共需2n＋1－2个引物，B错误；由DNA复制过程可知，复制的子代DNA分子中，只有含有最开始的模板链DNA分子只含有一个引物，其他DNA分子都同时含有两种引物，故理论上第4轮循环产物中含两种引物的DNA片段为：(24－2)/24＝7/8，C正确；第n次复制时，以第n－1次的DNA链为模板，根据半保留复制的特点可知，第n－1次复制得到的DNA分子数为2n－1个，DNA链数为2n个，故理论上第n次复制时，共需2n个引物，D正确。;5．(2024·湖南，15，改编)最早的双脱氧测序法是在PCR反应体系中，分别再加入一种少量的双脱氧核苷三磷酸(ddATP、ddCTP、ddGTP或ddTTP)，子链延伸时，双脱氧核苷三磷酸也遵循碱基互补配对原则，以加入ddATP的体系为例：若配对的为ddATP，延伸终止；若配对的为脱氧腺苷三磷酸(dATP)，继续延伸；PCR产物变性后电泳检测。通过该方法测序某疾病患者及对照

个体的一段序列，结果如图所示