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附录A

（资料性）

类器官模型构建与评估示例

示例1：类器官鉴定

羊小肠类器官整体由上皮细胞构成（β-catenin），复现了山羊回肠组织中肠内分泌细胞（CHGA）、

杯状细胞（MUC2）、短暂扩增（TA）细胞（Ki67）的分布，细胞内外侧极性模式（ZO-1）与肠腔一

致。

图A.1xxx

示例2：LSY体系下的TNF-α炎症模型

高内涵转盘共聚焦在长达96个小时的连续拍摄中获得到了大量图像，这些图像被OrganoID自动识

别。OrganoID勾勒出图像中类器官的边界并计算类器官区域的像素面积，以绘制生长曲线。为了使生

长曲线起点归一，每个小时的照片中类器官区域都除以初始类器官区域，比值被作为当前时间点的纵坐

标值。

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图A.2xxx

用于测试的类器官炎症模型生长曲线结果显示，第52个小时加入的TNF-α导致类器官出现发黑坏死区域，并导致了

类器官区域面积增长速率放缓。越高浓度的TNF-α对生长速率的减缓效果越明显。使用褪黑素对10ng/mL浓度TNF-α诱导

的类器官炎症模型治疗，结果表明100µM浓度的褪黑素治疗效果最好，几乎完全逆转了TNF-α对类器官生长速率减缓的

影响，同时明场图像中也没有出现类器官发黑坏死的迹象。

图A.3xxx

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图A.4xxx

示例3：LIFY体系下的TNF-α与IL-1β炎症模型

从健康山羊肠道内容物中筛选出4个代谢物，包括醛固酮（Aldosterone）、L-半胱亚磺酸

（L-Cysteinesulfinicacid）、褪黑素（Melatonin）和白藜芦醇（Resveratrol），除此之外，又额外加入

了当前一个明星药物二甲双胍（Metformin）。共有5个备选药物被加入到了萨能奶山羊肠炎类器官模型

被评估药物敏感性。鉴于传代过程中类器官碎片大小与包含的细胞量存在差异，大的类器官碎片生长速

度更快，小的碎片生长更慢，最终选择了将生长曲线在处理前后的斜率差值，作为衡量实验处理对类器

官生长影响的标准。

图A.5xxx

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药敏分析结果显示，72小时施加的HI、LI条件均使类器官区域面积生长曲线的斜率增长值（∆k）

减小，且HI对∆k的降低效果比LI更严重，这反映了腹泻山羊体内高水平炎症因子比健康山羊体内低水

平炎症因子对肠道组织的影响更为严重。5个药物在特定浓度下能够缓解甚至逆转以上变化（图8）。其

中，醛固酮和L-半胱亚磺酸在100µM浓度下能够逆转HI造成的类器官面积增长速度减缓，褪黑素在1

mM浓度下产生逆转效果，白藜芦醇和二甲双胍则是在10µM浓度下逆转生长