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福州pcr上岗证题库及答案

单项选择题（每题2分，共10题）

1.关于PCR技术的原理，下列说法正确的是（）

A.依赖DNA聚合酶对模板的特异性复制

B.基于RNA转录过程

C.依靠蛋白质合成机制

D.通过化学反应直接合成DNA

答案：A

解析：PCR技术是在体外模拟DNA体内复制过程，依赖DNA聚合酶对模板进行特异性复制来扩增特定DNA片段。

2.PCR反应体系中，起催化作用的酶是（）

A.限制性内切酶

B.DNA连接酶

C.DNA聚合酶

D.解旋酶

答案：C

解析：DNA聚合酶在PCR反应中催化dNTP聚合形成新的DNA链。

3.PCR反应的特异性主要取决于（）

A.引物的特异性

B.模板的纯度

C.反应体系的pH

D.缓冲液的成分

答案：A

解析：引物与模板特异性结合决定了扩增产物的特异性。

4.在PCR反应中，变性温度一般为（）

A.55℃左右

B.72℃左右

C.95℃左右

D.37℃左右

答案：C

解析：95℃左右可使双链DNA变性解链为单链。

5.PCR产物的检测方法不包括（）

A.凝胶电泳

B.核酸测序

C.免疫组化

D.荧光定量分析

答案：C

解析：免疫组化主要用于蛋白质检测，不是PCR产物检测方法。

6.下列哪种物质可作为PCR的模板（）

A.蛋白质

B.多糖

C.DNA

D.脂肪

答案：C

解析：PCR是以DNA为模板进行扩增。

7.PCR反应中，退火温度与下列哪项有关（）

A.引物长度

B.模板浓度

C.DNA聚合酶活性

D.dNTP浓度

答案：A

解析：引物长度等因素会影响退火温度。

8.实时荧光定量PCR主要用于（）

A.基因分型

B.基因表达定量分析

C.突变检测

D.核酸序列测定

答案：B

解析：通过荧光信号实时监测PCR进程，可对基因表达进行定量分析。

9.PCR技术的发明人是（）

A.穆利斯

B.桑格

C.吉尔伯特

D.沃森

答案：A

解析：穆利斯发明了PCR技术。

10.以下哪种情况可能导致PCR假阳性结果（）

A.引物设计不合理

B.模板污染

C.Taq酶失活

D.dNTP浓度过低

答案：B

解析：模板污染会使非目标DNA被扩增，导致假阳性。

多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应体系通常包含以下哪些成分（）

A.模板DNA

B.引物

C.dNTP

D.DNA聚合酶

E.缓冲液

答案：ABCDE

解析：这些都是PCR反应必需的成分，模板提供扩增的起始序列，引物引导合成，dNTP是合成原料，DNA聚合酶催化反应，缓冲液维持合适反应环境。

2.PCR引物设计的原则包括（）

A.长度一般为15-30bp

B.碱基分布均匀

C.避免引物间形成二聚体

D.与模板具有较高特异性结合

E.引物3端不能有连续3个相同碱基

答案：ABCDE

解析：这些原则有助于保证引物的有效性和特异性，合适长度利于结合，均匀碱基分布、避免二聚体、高特异性结合及3端要求都是为了获得准确扩增产物。

3.影响PCR扩增效率的因素有（）

A.模板质量

B.引物浓度

C.Mg2?浓度

D.循环次数

E.退火温度

答案：ABCDE

解析：模板质量好、引物浓度合适、Mg2?浓度适宜、循环次数合理及退火温度恰当都对扩增效率有影响。

4.PCR技术可应用于（）

A.基因克隆

B.遗传病诊断

C.病原体检测

D.肿瘤诊断

E.法医鉴定

答案：ABCDE

解析：在这些领域PCR技术都发挥着重要作用，可扩增特定基因用于克隆，检测相关基因异常用于遗传病、肿瘤诊断及病原体检测，还可用于法医鉴定个体身份等。

5.实时荧光定量PCR的荧光标记方法有（）

A.SYBRGreenI染料法

B.TaqMan探针法

C.分子信标法

D.荧光共振能量转移法

E.化学发光法

答案：ABCD

解析：这些都是常见的实时荧光定量PCR荧光标记方法，通过不同方式实现对扩增产物的荧光监测。

6.PCR反应中，延伸温度一般选择72℃左右是因为（）

A.Taq酶在72℃活性最高

B.有利于引物与模板结合

C.便于dNTP聚合

D.可加快反应速度

E.防止模板降解

答案：ACD

解析：Taq酶在72℃时聚合活性最佳，能高效催化dNTP聚合形成新链，从而加快反应速度。

7.下列哪些是PCR反应的特点（）

A.特异性强

B.