药食同源中药天然产物提取物抗幽门螺杆菌作用研究—以覆盆子及肉桂为例.pdfVIP

摘要

幽门螺杆菌（Helicobacterpylori,H.pylori,Hp作为革兰氏阴性微需氧菌主要

在人体胃黏膜组织。人群中Hp感染率高达一半。幽门螺杆菌感染可导致包括胃炎，

消化性溃疡及肠化生等多种上消化道疾病，因此防治及根除Hp可以显著提升患者的

整体生活质量。

本研究首先进行了体外抑菌实验，复苏并表征了幽门螺杆菌。随后利用纸片法从

四种治疗幽门螺杆菌效果较好的中药天然产物提取物中筛选出两种抑菌效果较好的

提取物肉桂提取物及覆盆子提取物。进一步利用肉汤稀释法测定两种药食同源天

然产物的主要成分肉桂醛（肉桂提取物）和没食子酸（覆盆子提取物）对幽门螺杆菌

标准菌株ATCC43504的最低抑菌浓度。结果表明肉桂醛最低抑菌浓度为312.5μg/mL，

没食子酸最低抑菌浓度为625μg/mL。后续实验将围绕两种提取物主成分展开，与此

同时，半固体穿刺法验证了肉桂醛及没食子酸对幽门螺杆菌运动能力的影响，实验表

明肉桂醛及没食子酸在MIC都可以显著抑制运动能力，并且荧光定量PCR法检测到

其可明显抑制运动相关基因FlaA、FlaB的表达。接下来的抗粘附实验表明二者MIC

浓度下可以抑制粘附相关基因AlpA、AlpB的表达。其结果进一步明确了肉桂醛及没

食子酸对幽门螺杆菌的抑制作用。最后，本文通过体外培养胃上皮永生化细胞（GES-

1），经CCK-8实验探讨了肉桂醛及没食子酸的细胞安全性。结果表明在给药浓度下

48小时内细胞存活率均大于80%，证实在给药浓度下提取物不会引起明显的细胞毒

性，可见其具有较高的的生物安全性。可以用于后续的体内活性评价。

体内实验，通过灌喂小鼠幽门螺杆菌建立体内感染幽门模型，探讨了肉桂醛及

没食子酸对幽门螺杆菌的体内作用效果。将造模成功的小鼠随机分成阳性组，模型组，

空白组，肉桂醛及没食子酸治疗组并对各组进行体内初步抑菌评价。通过体内实验氧

化酶实验，利用处于生长活跃期的菌株9天5次可以建立体内感染小鼠模型。此后的

HE染色实验，观察到经过肉桂醛及没食子酸治疗的小鼠胃黏膜局部破损情况得到显

著改善，实验表明没食子酸在62.5mg/kg/day及肉桂醛31.25mg/kg/day的灌胃条件

下可以治疗体内幽门螺杆菌感染并修复损伤胃部破损粘膜，此结果与体外抑菌实验是

一致的。利用网络药理学进一步的阐明其作用机制，提示其主要作用靶点蛋白TNF，

AKT1，IL6，EGFR，ESR1等，从而干扰Hp的定植，达到治疗幽门螺杆菌的作用，

为我们后续工作提供参考。

综上所述，本课题筛选的肉桂醛及没食子酸具有较好的应用前景，其对幽门螺杆

菌显现出了较高的抑制能力。其中抗运动能力与抑制控制幽门螺杆菌鞭毛的FlaA、

FlaB基因表达有关，而抗粘附能力与抑制粘附蛋白FlaA、FlaB基因表达有关。与此

同时，肉桂醛及没食子酸对正常细胞无明显毒副作用，且在体内清除能力较好。是极

具潜力的治疗幽门螺旋杆菌药食同源中药天然产物，有可能替幽门螺旋杆菌的防治提

供新的思路。

关键词：幽门螺杆菌；药食同源；中药天然产物；抑菌能力

Abstract

Helicobacterpylori(H.pylori,Hp)isakindofGram-negativemicroaerobicbacteria,

whichmainlyparasitizehumangastricmucosa.OuradultHpinfectionrateisashighas40%

~60%.Helicobacterpyloriinfectioncanleadtoavarietyofupperdigestivetractdiseases

includinggastritis,pepticulcersandintestinalmetaplasia,sopreventionanderadicationof

Hpcanprovidelifelongbenefits.

Inthisstudy,thebacteriostaticexperimentwascarriedoutinvitro,andHelicobacte