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马立克氏病MEQ基因转染CEF细胞对微卫星稳定性及错配修复基因的影响探究

一、引言

1.1研究背景

马立克氏病（Mareksdisease，MD）是一种由马立克氏病毒（Mareksdiseasevirus，MDV）引起的多器官淋巴瘤性疾病，主要发生在鸡身上，对家禽养殖业造成了严重的经济损失。在家禽养殖环境中，MDV的传播极为普遍，患病鸡不仅自身生长发育受阻，产蛋量大幅下降，而且病死率颇高，给养殖户带来了沉重的打击。

为了深入探究马立克氏病的致病机制并推动疫苗研发，利用重组DNA技术成为了当前应用最广泛且效果最佳的途径，而MEQ基因则在这一过程中扮演着关键角色。MEQ基因作为MDV的主要致瘤基因，其编码的MEQ蛋白不仅具备转录活化功能，还能与C-末端结合蛋白家族（CtBPs）转录辅助抑制因子相结合，形成转录抑制复合物，进而对目的基因的转录产生抑制作用。研究表明，将MEQ基因导入细胞后，能够有效激发细胞的免疫反应，增强细胞对病毒的抵御能力，展现出了良好的抗病毒效果。

然而，MEQ基因在转染细胞后，会引发部分微卫星不稳定和错配修复现象，这对细胞的DNA稳定性产生了极大的影响。微卫星是基因组中由1-6个核苷酸组成的简单重复序列，其稳定性对于维持基因组的完整性至关重要。一旦微卫星出现不稳定的情况，就可能导致基因的突变、缺失或扩增，进而引发细胞功能的异常。错配修复则是细胞内一种重要的DNA修复机制，能够识别并纠正DNA复制过程中出现的碱基错配、小的插入或缺失等错误。当错配修复基因的表达或功能出现异常时，细胞的DNA修复能力就会显著下降，使得细胞更容易受到各种致癌因素的影响，增加肿瘤发生的风险。因此，深入研究MEQ基因转染后引起的这些问题，对于解决MDV疫苗研发中的关键难题具有重要的意义。

1.2研究目的与意义

本研究旨在深入探讨MEQ基因转染细胞后引发部分微卫星不稳定和错配修复的具体机制，并全面分析MEQ基因对CEF细胞DNA稳定性的影响。通过这一研究，期望能够揭示MEQ基因转染与细胞DNA稳定性之间的内在联系，为优化MDV疫苗的研发提供坚实的理论基础和实验依据。

马立克氏病作为鸡养殖过程中的重要疾病之一，对养鸡业的健康发展构成了严重威胁。本研究成果对于马立克氏病的防治和疫苗研发具有不可忽视的重要意义。一方面，深入了解MEQ基因转染的机制，有助于我们更加精准地调控基因的表达，提高疫苗的安全性和有效性，从而为马立克氏病的预防和控制提供更为有效的手段；另一方面，本研究也为深入探究马立克氏病的致病机制开辟了新的思路和实验基础，有望推动相关领域的进一步发展，为家禽养殖业的可持续发展保驾护航。

二、相关理论基础

2.1马立克氏病概述

马立克氏病是一种由马立克氏病病毒引起的鸡的淋巴组织增生性肿瘤病，对养鸡业危害巨大。MDV属于α-疱疹病毒科马立克氏病毒属，具有严格的细胞结合性，其基因组为双股线性DNA，包含独特长区（UL）、独特短区（US），两侧被反向重复序列环绕。MDV依据致病性和血清型可细致分类，血清1型毒株对鸡具有致病性且能诱发肿瘤，如Md5、JW、GA等毒株；血清2型毒株对鸡无致病性，像301B/1、SB/1等；血清3型是从火鸡分离出的疱疹病毒株（FC126株），对鸡同样无致病性。

马立克氏病在临床上症状多样，主要分为神经型、内脏型、眼型和皮肤型。神经型常侵害坐骨神经和臂神经等周围神经，导致病鸡出现“劈叉”姿势、翅膀下垂等运动障碍；内脏型会使病鸡精神萎靡、食欲减退，内脏多种器官出现肿瘤；眼型表现为瞳孔缩小、虹膜边缘不整齐；皮肤型主要表现为毛囊肿大或皮肤出现结节。病理剖检时，神经型可见神经横纹消失、变粗水肿；内脏型可见内脏器官的肿瘤病变。

在流行病学方面，MDV传播能力强，主要通过空气传播，病鸡和带毒鸡是主要传染源。鸡群一旦接触病毒，感染率可迅速达到100%。该病通常在12-30周龄左右发病，近年来发病时间有提前趋势，且急性发病症状愈发严重，这表明MDV毒力在逐渐增强。感染MDV的鸡不仅自身生长发育严重受阻，产蛋量大幅下降，病死率也颇高，给家禽养殖业带来了沉重的经济负担，严重制约了养鸡业的健康发展。

2.2MEQ基因解析

MEQ基因是MDV的关键致瘤基因，在病毒致病和致瘤过程中发挥着核心作用。该基因编码的MEQ蛋白具有独特的结构和功能特性，其N-末端包含碱性亮氨酸拉链（bZIP）结构域，这一结构域对于MEQ蛋白与特定DNA序列的结合以及蛋白之间的相互作用至关重要，能够识别并结合靶基因启动子区域的特定序列，从而调控基因的转录过程；C-末端则存