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病理科组织病理学规范

CATALOGUE

目录

01

标本接收与处理

02

组织固定

03

脱水与包埋

04

切片与染色

05

显微镜检查

06

质量控制

01

标本接收与处理

唯一标识系统

采用条形码或二维码技术对标本进行唯一标识，确保从接收、处理到诊断全流程可追溯，避免混淆或丢失风险。

双人核对制度

电子化登记流程

标本登记与识别规范

接收时需由两名工作人员同步核对患者信息、标本类型及数量，并记录异常情况（如容器破损、标本量不足等）。

通过病理信息系统（LIS）录入标本详细信息，包括临床病史、送检科室及特殊处理要求，确保数据完整性与实时共享。

初步检查与记录标准

肉眼观察与描述

记录标本大小、形状、颜色、质地及异常特征（如坏死、出血），使用标准化术语（如“结节状”“囊性变”）确保描述一致性。

标本摄影存档

对特殊或疑难标本进行高清拍照并关联电子病历，为后续诊断和教学提供可视化依据。

分装与标记规范

根据检测需求将标本分装至不同容器，标注“优先处理”或“补充固定”等标签，避免交叉污染或处理延误。

操作人员需穿戴防护服、手套、护目镜及口罩，处理高风险标本（如结核组织）时增加N95口罩和面屏防护。

个人防护装备（PPE）

使用10%中性缓冲福尔马林固定标本至少6小时，确保病原体灭活；高风险标本需单独存放并标注生物危害标识。

标本固定与灭活

锐器置于防刺穿容器，污染耗材经高压灭菌后按医疗废物处理，液体废料需中和后排放，符合环保法规要求。

废弃物分类处置

生物安全处理要求

02

组织固定

固定液选择与应用

作为标准固定液，其渗透性强且能有效保存组织形态，适用于大多数常规病理标本，尤其对核染色质和细胞器结构的保存效果显著。

中性缓冲福尔马林

适用于快速固定或特殊染色需求的组织，如糖原染色，但可能导致组织收缩，需根据检测目的调整浓度和浸泡时间。

主要用于电镜样本制备，能超微结构保存，但渗透速度慢，需配合前处理步骤使用。

乙醇类固定液

含苦味酸和乙酸，对结缔组织或胚胎组织的固定效果优异，但需注意其对核酸的破坏作用，不适用于分子病理学检测。

特殊固定液（如Bouin液）

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03

醛类固定液（如戊二醛）

固定时间控制原则

1

2

3

4

厚度相关性

组织块厚度需控制在合理范围内（通常不超过5mm），过厚会导致固定液渗透不足，中心区域出现自溶或假阴性结果。

室温下固定效率最佳，低温会显著延缓固定进程，高温则可能引起组织过度硬化，影响后续切片质量。

温度影响

动态监测

对大型标本或特殊组织（如脂肪、骨组织）需定期评估固定效果，必要时补充固定液或延长固定时间。

二次固定规范

针对特殊检测（如免疫组化），需在初级固定后转入专用固定液，避免抗原表位被遮蔽或降解。

通过HE染色观察细胞核与胞浆的清晰度，核膜完整、染色质分布均匀为优质固定标志，模糊或空泡化提示固定不良。

染色对比分析

采用PCR或WesternBlot验证核酸/蛋白完整性，固定过度可能导致DNA断裂或蛋白交联，影响下游分子病理结果。

分子完整性检测

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03

04

合格固定的组织应具备适度硬度，切割时无黏腻感，且切面均匀无软芯，若出现局部软化或变色需重新固定。

物理性状检查

实验室需制定固定合格率指标，定期抽查标本并记录固定参数（如液量比、渗透深度），纳入质量管理体系持续优化。

质控标准建立

固定质量评估方法

03

脱水与包埋

梯度酒精脱水程序

脱水后需使用二甲苯等透明剂置换酒精，使组织呈现透明状态，便于后续石蜡渗透。透明时间过长可能导致组织脆化，需严格监控透明剂的新鲜度和更换频率。

透明剂处理

自动化设备校准

采用全自动脱水机时，需定期校准液体更换周期、温度及搅拌速度，确保程序参数与标准操作手册一致，避免因设备误差导致脱水不均。

组织标本需依次经过不同浓度的酒精（如70%、80%、95%、100%）进行梯度脱水，确保水分被彻底置换，避免组织收缩或硬化。每道酒精浸泡时间需根据组织类型和厚度精确控制，通常为1-2小时。

脱水流程标准化

包埋材料与技术要求

包埋石蜡的熔点需根据实验室环境温度和组织特性选择（通常为56-60℃），低熔点石蜡适用于脂肪或疏松组织，高熔点石蜡则适合致密组织。石蜡纯度需达到医用级，避免杂质影响切片质量。

石蜡选择与熔点匹配

使用金属或塑料模具时，需确保其尺寸统一且边缘无缺损，避免包埋块形态不规则。模具预冷温度应略低于石蜡熔点，以加速石蜡凝固并减少气泡形成。

包埋模具标准化

包埋前需根据切片需求调整组织方向（如肠管纵切面朝下），并在包埋盒上清晰标注病例编号，防止混淆。包埋操作需在恒温台进行，维持石蜡流动性。

组织定向与标识

包埋质量控制要点

石蜡渗透检测

通过切片观察组织内部是否存在未渗透区域（表现为白色云雾状），若发现渗透不