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第八章微生物遗传和变异详解演示文稿;优选第八章微生物遗传和变异;表型饰变:;第一节遗传变异的物质基础;1928年,F.Griffth作了3组实验:;1944年,Avery精确重复了转化实验,确定了转化因子;2、噬菌体感染实验;3、植物病毒重建实验;(一)微生物基因组结构的特点;2、真核微生物的基因组;3、原核生物和真核生物的基因组比较;(二)原核生物的质粒;现在是13页\一共有59页\编辑于星期四;2、结构特点
通常以共价闭合环状超螺旋双链DNA分子存在
具有自我复制能力;
(3)质粒基因不是生长所必需,但决定宿主细胞的某些特性;
(4)具有不相容性;
可自行或以人工方法消除
可从一个细菌转移给另一个细菌;3、质粒的主要种类;现在是16页\一共有59页\编辑于星期四;4、质粒在基因工程中的应用
质粒的优点:
(1)体积小,易分离和操作
(2)环状,稳定
(3)独立复制
(4)拷贝数多
(5)存在标记位点,易筛选
E.coli的pBR322质粒是一个常用的克隆载体;第二节基因突变;(一)突变类型;(二)基因突变的特点
1、自发性:各种性状的突变,可以在没有人为诱变因素下自发发生。
2、不对应性:突变性状与引起突变的原因间无直接对应关系。
3、稀有性:一般在10-6~10-10。
4、独立性:两个基因发生突变是各不相关的两个事件。
5、可诱变性:过诱变剂的作用,可提高自发突变的频率,一般可提高10~105。
6、稳定性:产生的新性状可稳定遗传。
7、可逆性:任何性状既有正向突变,也可发生回复突变。;(三)基因突变自发性和不对应性的实验证明;变量实验(fluctuationanalysis);Newcombe的涂布实验(1949);影印实验(replicaplating);(四)基因突变及其机制;1、诱发突变:物理、化学核生物的因素,提高突变率的人为的作法
(1)碱基的置换;碱基的置换引起的突变;(2)移码突变:添加或缺失核苷酸,引起阅读错误;(3)染色体畸变:缺失、重复、插入、易位、倒位;2、自发突变:无人为因素下的低频率突变原因:
(1)背景辐射
(2)有害产物积累
(3)碱基错配;第三节基因重组;1、建立了感受态的受体细胞
感受态细胞:具有摄取外源DNA能力的细胞
自然感受态的出现是细胞一定生长阶段的生理特性,受细菌自身的基因控制;
人工感受态则是通过人为诱导的方法,使细胞具有摄取DNA的能力,或人为地将DNA导入细胞内
2、外源游离DNA分子(转化因子)
;转化过程(革兰氏阳性菌的转化模型);噬菌体DNA被感受态细胞摄取并产生有活性的病毒颗粒;(二)细菌的转导(transduction);普遍转导(generalizedtransduction);;局限转导;局限转导与普遍转导的主要区别:;(三)接合(conjugation);接合机制(大肠杆菌的接合机制);F因子的四种细胞形式;1)F+×F-杂交;现在是44页\一共有59页\编辑于星期四;2)Hfr×F-杂交;染色体上越靠近F因子的先导区的基因,进入的机会就越多,在F-中出现重组子的的时间就越早,频率也高。;现在是47页\一共有59页\编辑于星期四;3)F′×F-杂交;现在是49页\一共有59页\编辑于星期四;;第四节微生物遗传学的应用;二、Ames试验;美国加利福尼亚大学的BruceAmes教授于1966年发明,因此称为Ames试验。
具体操作:检测鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphmurium)组氨酸营养缺陷型菌株(his-)的回复突变率。
回复突变:突变体失去的野生型性状,可以通过第二次突变得到恢复,这种第二次突变称为回复突变。
;证明Ames试验重要性的应用实例:
国外曾开发了一种降低妇女妊娠反应的药物“反应停”,由于其药效显著,在60-70年代十分流行。
但随后人们就发现畸形儿的出生率明显增高,而且生产畸形儿的妇女大多曾服用“反应停”,后来采用Ames试验发现这种物质的确具有很强的致突变作用,因此这种药物被禁止使用。
但如果能在这种药物上市之前就进行Ames试验检测,那么这种大量出生畸形儿的悲剧完全可以避免。;三、菌种的衰退、复壮和保藏;(一)菌种的衰退与复壮;1)从衰退的菌种群体中把少数个体再找出来,重新获得具有原有典型性状的菌种。
a)纯种分离;
b)通过寄主体进行复壮;
;(二)防止衰退的措施
1)减少传代次数;
2)创造良好的培养条件;
3)利用单核体传代
4)经常进行纯种分离,并对
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