检测技术方法20120512讲课文档.ppt

检测技术方如何区分不同的检测方法;酶联免疫（ELISA）

基础知识;免疫检测的基础知识;免疫检测的基础知识;1.2抗体

1.2.1抗体的结构

抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五类，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与免疫测定有关的Ig主要为IgG和IgM。;酶联免疫法;酶联免疫法;;酶联免疫法;酶联免疫法;酶联免疫法;酶联免疫法;酶联免疫法;ELISA检测方法;夹心法;双抗原夹心法示意图;夹心法;;ELISA的测定模式;间接法;;间接法测抗体;间接法;竞争法;竞争法测抗体;TMB

+H2O2;捕获法;固相捕获法测IgM抗体;ELISA试剂盒组分;酶标板;包被的方式;包被用抗原;包被用抗体;包被的条件;封闭;结合物;酶;结合物的制备;结合物的制备;结合物的保存;结合物的稀释液;酶的底物;洗涤液;酶反应终止液;阳性对照品和阴性对照品;参考标准品;ELISA的操作要点;标本的采取和保存;标本的采取和保存;试剂的准备;加样;温育;温育;温育;洗涤;显色;测量;质量控制;误差;真值;准确度;精密度

;标准品;质量控制血清;室内质量控制程序;;酶免疫测定操作中的注意事项;标本的收集和保存

;试剂准备;加样;温育

;洗板;显色;比色

;结果判断;定性？定量？;定性测定结果确定的依据;概念;概念;测定结果的报告和数据处理;定义;定义;定义;定义;1.不需r-计数器、荧光显微镜、酶标检测仪等贵重仪器，

更适用于现场应用。

2.没有诸如放射性同位素、邻苯二胺等有害物质的参与，

更加安全。

3.实验结果和金标探针可以长期保存。

4.自带质控对照，不需其它试剂。

5.由于省去了底物反应这一步，因此和EIA相比，时间大

大缩短，简单快速，可单人份操作。

6.由于操作简单快速，可用于个人或家庭检测。;胶体金即金的水溶液，是一种带负电荷的疏水胶体溶液，颗粒之间由于静电作用而保持一个稳定的胶体状态，可通过还原剂将氯化金分子聚合成特定大小的金颗粒来制备。胶体金通过静电及其表面的物理特性与多种生物大分子结合，形成蛋白质-金颗粒复合物，即胶体金探针。;采用化学还原法，其过程可以认为是一个结晶过程，颗粒的大小取决于还原剂所致晶核的形成速度和结晶生长速度。目前主要有以下几种制备方法：;WT;试纸条工作原理;三、试纸条的结构及制造工艺;试纸条结构示意图;工艺流程;1.原料处理应用

单抗预处理：透析、浓缩

点样：检测线、对照线、金标抗原

包被：交联、封闭、其他处理;4.中间检测

点样均一

原材料完整、无破损

粘贴整齐;谢谢大家！