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试验研究

EXPERIMENTALSTUDY

DOI:10.19904/14-1160/s.2025.03.003

基于ITS序列分析鉴别酸枣仁及其混伪品

张凤，台晶杰，牛四坤，田艳花

（山西药科职业学院，山西太原030031）

摘要：为探究基于ITS序列建立酸枣仁及其市场混伪品的分子鉴定方法，收集了酸枣仁及其常见混伪品理枣仁、积

棋子，提取了DNA，建立ITS序列设计引物并进行PCR扩增，测序扩增产物序列进行对比，并成功建立了基

于ITS序列的酸枣仁及其混伪品的分子鉴定方法。通过对10个样品的ITS序列进行PCR扩增和测序，结果表

明，所有酸枣仁样品与Ziziphusjujuba的序列相似性均在99%以上，而混伪品积棋子和理枣仁的序列相似

性分别为97.26%和99.26%。结果表明，ITS序列分析是一种有效的分子鉴定工具，能够准确区分酸枣仁及

其常见的混伪品。

关键词：酸枣仁；ITS；DNA提取；PCR扩增；序列测定和分析

中国图书分类号：R282.5文献标志码：B

文章编号：1005-2690(2025)03-0007-03

酸枣仁是鼠李科植物酸枣（Ziziphusjujuba)AppliedBiosystems公司），精密移液器（Eppendorf

的果实，酸枣仁的主要产地包括辽宁、河北、河南、Co.，Germany公司），NanoDrop2000ND2000（美国

山西、山东、陕西和安徽等多个省份[1]。这种食材性Thermo.公司），MiniPro300VPowerSupply电泳仪，

质温和，其口感醇厚而甘甜。酸枣仁主要功效为：镇电泳槽（美国majorscience

静、催眠、镇痛、抗惊厥、降血压、降血脂、提高免型号检测仪（AppliedBiosystems公司，美国）。

疫力、抗缺氧、抗心律失常、延缓衰老、抗辐射和抗1.2试剂

血栓形成，可治疗失眠、心跳过速、多梦、身体虚弱植物基因组DNA提取试剂盒（TaKaRaDRR2OAM），

多汗、津损、口干舌燥等[2]。近年来，随着我国南方琼脂糖（上海赛恒生物061180），PCR引物（上海赛

酸枣仁的数量不断下降，导致其原料供应严重不足，恒生物PAGE纯化），0.2、1.5mLEP管（上海赛恒生

目前我国药材市场上出现以同属植物滇刺枣的种子理物KG2211)，dNTP(TaKaRaD4030A)。

枣仁混作酸枣仁出售的情况，另外，也存在着积棋子1.3药材

（也称拐枣仁）、紫荆子等混伪品[3]。目前的中药鉴定药材购于河北安国药材市场，样品共10批，其

技术主要利用观察中药材外观、显微结构、薄层色中包括酸枣仁8批、理枣仁1批、积棋子1批。药材

谱、电泳、UV光谱、扫描电子显微镜等技术，然而，来源信息见表1。

不同类型的药材在外形性状上相似，且微观结构特征

2实验方法

不显著，化学组成比较复杂，上述技术特异性较差，

并且易受外界因子的影响，造成结果不准确[4-6]。本2.1引物序列设计

次研究计划使用ITS序列来作为分子标记，采用位点引物序列设计见表2。

特异性PCR方法，在分子水乎上选择真正高度特异性2.2植物基因组DNA的提取

的区段，设计出一种迅速、可靠的分子鉴定技术，专将样本研磨成粉，植物基因组DNA提取试剂盒提

门用于识别酸枣仁和其他容易混淆的中药原料。取样品DNA，并置于-20℃环境中储存。