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实验八土壤中微生物的分离第1页,共11页,星期日,2025年,2月5日实验原理土壤是微生物生活的大本营细菌数亿/g土壤,土壤中的细菌总重量估计为:10034×1012吨;根据某微生物的生长条件(营养,酸碱度,温度,氧气等)而供给它适宜的培养条件,或加入某种抑制剂造成只利于某种菌的生长,而抑制其他菌的生长;用稀释涂布平板法获得单菌落(并不能绝对保证是纯培养,需要结合观察其菌落特征、个体特征,进一步分离纯化);第2页,共11页,星期日,2025年,2月5日实验目的熟悉常用微生物培养基;掌握利用平板分离法从土壤中分离微生物的基本操作;认识土壤环境中微生物的多样性。第3页,共11页,星期日,2025年,2月5日微生物的分离及稀释平板法计数(1)倾注平板法(混合平板法)(2)涂布平板法菌落计数稀释到适量浓度倾注或涂布平板培养第4页,共11页,星期日,2025年,2月5日第5页,共11页,星期日,2025年,2月5日采用培养平板计数法要求操作熟练、准确,否则难以得到正确的结果:样品充分混匀;每支移液管及涂布棒只能接触一个稀释度的菌液;同一稀释度三个以上重复,取平均值;每个平板上的菌落数目合适,便于准确计数;一个菌落可能是多个细胞一起形成,所以在科研中一般用菌落形成单位(colonyformingunits,CFU)来表示,而不是直接表示为细胞数。第6页,共11页,星期日,2025年,2月5日实验步骤将10g土样装入含90ml无菌水的锥形瓶中振荡20min取1ml迅速移入含9ml无菌水的试管中,吹吸均匀,为稀释10倍的样品依次进行梯度稀释涂布合适稀释度的样品0.1ml于已经倒好冷却的相应的培养基上,倒置培养第7页,共11页,星期日,2025年,2月5日实验安排10-610-710-8稀释度为细菌培养10-410-510-6稀释度为放线菌培养10-210-310-4稀释度为真菌培养第8页,共11页,星期日,2025年,2月5日
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