实验三酵母核酸的制备及成份鉴定.pptVIP

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2025-09-17 发布于广东
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实验三酵母核酸的制备及成份鉴定.ppt

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实验三酵母核酸的制备及成份鉴定第1页，共10页，星期日，2025年，2月5日一、目的

了解核酸的组分，并掌握鉴定核酸组分的方法以了解苔黑酚定量测定RNA的方法。第2页，共10页，星期日，2025年，2月5日二、原理酵母核糖核酸中RNA含量较多，RNA可溶于碱性溶液，在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使解聚的核糖核酸沉淀，即得到RNA的粗制品。核糖核酸中含有核糖、嘌呤碱，嘧啶碱和磷酸各组分，加硫酸煮沸可使其水解，从水解液中可以测出上述组分的存在。第3页，共10页，星期日，2025年，2月5日1.磷酸磷酸与钼酸铵试剂作用生成黄色磷钼酸，磷钼酸中的钼在有还原剂（Vc）存在时可被还原成蓝色的钼蓝。根据此呈色反应即可鉴定磷酸的存在。2.嘌呤碱根据嘌呤碱能与硝酸银产生灰褐色的絮状嘌呤银化合物而鉴定。第4页，共10页，星期日，2025年，2月5日3.戊糖根据核糖经浓盐酸或浓硫酸作用则生成糠醛，后者能与3，5二羟甲苯缩合而形成绿色化合物而鉴定。脱氧核糖在浓酸中生成ω-羟基-γ-酮基戊醛，它和二苯胺作用生成蓝色化合物。第5页，共10页，星期日，2025年，2月5日三、器材锥形瓶大研钵电子天平离心机恒温水浴锅

注意仪器使用方法离心管平衡!!第6页，共10页，星期日，2025年，2月5日四、试剂和材料酵母粉0.04MNaOH,95%乙醇,1.5MH2SO4溶液,浓氨水,0.1MAgNO3酸性乙醇溶液：30ml95%乙醇加0.3ml浓盐酸混匀。苔黑酚--FeCl3溶液：将100mg苔黑酚溶于100ml浓HCl中,再加入100mgFeCl3.6H2O，临用时配制。定磷试剂：

按顺序以A：B：C：蒸馏水＝1：1：1：2（V/V）混匀,现配。

A、17%H2SO4：将17ml浓硫酸缓缓加入83ml水中。

B、2.5%（NH4）6Mo7O24：2.5g（NH4）4Mo2O7溶于100ml蒸馏水中。

C、10%Vc：10gVc溶于100ml蒸馏水中，用棕色瓶贮存。颜色呈淡黄色时可以使用，如呈深黄或棕色则失效。第7页，共10页，星期日，2025年，2月5日