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3、光度计由狭缝S3射出的单色光由截光器以脉冲输送，并由光束劈分器分裂成两束光，一束是样品光束，另一束是参比光束，两束光由辟分器反射到M7、M8，再由M7、M8反射到透镜L1、L2到达样品室及参比室，L1、L2是使两束光具有良好的平行性质。4、检测室进入检测室的光束被聚焦在独立的光电倍增管上，产生的电流大小与照射到检测器的能量成正比。由于样品光束吸收能量，所以使样品室与参比室之间产生不平衡电压，此比平衡电压被一个滑线电阻的等价电压所平衡，记录笔随滑线电阻的触点移动，记录笔的移动即反应了样品吸收能量的大小，记录下来的是波长与透射率关系的紫外光谱图。分光光度计的类型第30页，共62页，星期日，2025年，2月5日3.双波长将不同波长的两束单色光(λ1、λ2)快束交替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。△?=1～2nm。两波长同时扫描即可获得导数光谱。分光光度计的类型第31页，共62页，星期日，2025年，2月5日双波长分光光度计的优点：对于多组分混合物、混浊试样(如生物组织液)的分析，以及存在背景于扰或共存组分吸收干扰的情况下，利用双波长分光光度法，往往能提高方法的灵敏度和选择性。利用双波长分光光度计，能获得导数光谱。通过光学系统转换，使双波长分光光度计能很方便地转化为单波长工作方式。如果能在两波长处分别记录吸光度随时间变化的曲线，还能进行化学反应动力学研究。其基本光路如下图所示。由同一光源发出的光被分成两束，分别经过两个单色器，得到两束不同波长的单色光;再利用切光器使两束光以一定的频率交替照射同一吸收池，然后经过光电倍增管和电子控制系统，最后由显示器显示出两个波长处的吸光度差值ΔA(ΔA=A1-A2)。分光光度计的类型第32页，共62页，星期日，2025年，2月5日实验室现有紫外-可见光谱仪器型号：Helios系列

厂家：美国热电

分光光度计的类型-Helios系列第33页，共62页，星期日，2025年，2月5日技术参数

波长范围:190-1100nm

光度范围:-0.3~6A

分光系统:单光束

全息衍射母光栅,石英镀膜

带宽:2.0nm

波长扫描速度:3800nm~1nm/min或智能扫描

0.1nm数据采集精度

杂散光:0.05%(220nm)

0.05%(340nm)波长精度:±1.0nm(190-1100nm)

±0.1nm(氘灯656.1nm)

波长重复性:±0.2nm(190-1100nm)

±0.03nm(氘灯656.1nm)

吸光度精度:±0.005Aat1A

吸光度重复性:±0.002Aat1A

光密度噪音:0.0001A(RMS)

稳定性:0.002A/小时

检测器:光电二极管分光光度计的类型-Helios系列参数第34页，共62页，星期日，2025年，2月5日◆?仪器设计小巧，样品室大。?

???

◆?卓越的设计:?2nm带宽步进单色器，独家采用全息母光栅（MIG），提供无与伦比的精度、线性、稳定性。石英涂层密封光路自始自终保持仪器性能;?精确地浇铸铝底座，保证结实耐用及高稳定性

◆?多功能软件?:??本机控制软件，用户可编辑方法；扫描速度可调，最大速度为3800nm/min，有判峰选择，容易识别；自动存盘及自动打印，可快速处理结果；字母数字样品号自动识别并自动增加，用于提高批量样品处理；打印和存盘前数据综合处理。???

◆?标准功能齐全:??扫描，固定波长，定量分析，浓度因子，比率和校正比率，一系列波长，多波长（多达20个），多组份分析（多达20组份），动力学研究。???

◆?多种数据输出方式???

????存入仪器内存或内置软驱，可把数据传到其他Helios仪器；或通过内置和外部打印机打印出硬拷贝，通过RS232输出到LIMS，传到Vision?PC软件和其他PC程序（ASCII格式），来进行离线数据处理。???

◆?测量样品量可低至5μl。做非平行和平行动力学实验，可选恒温7池编程器。?分光光度计的类型-Helios系列特点第35页，共62页，星期日，2025年，2月5日1.分离提纯:紫外光谱一般只用于单纯定性分析。进行样品测试时应该先进行样品的分离提纯。TLC检测提纯情况。2.样品溶解：使用适当溶剂溶解。3.选择样品池紫外光谱吸收带的数目少而且宽，对结构变化不敏感。测试前的准备工作-样品尽量选择在紫外透明或者在测定最大波长处无吸收的溶剂紫外区域使用石英样品池；可见光区可选择玻璃/塑料材质样品池第36页，共62页，星期日，2025年，2月5日波长校正可采用辐射光