血液标本的临床检验.pptVIP

第1页，共18页，星期日，2025年，2月5日血液及骨髓标本的细菌学检验第2页，共18页，星期日，2025年，2月5日一、标本的采集

1．采血指征：发热(≥38℃)或低温(≥36℃)寒战，白细胞增多，皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭，血压降低，C反应蛋白升高及呼吸加快，血液病患者出现粒细胞减少，血小板减少等，或同时具备上述几种体征时而临床可疑菌血症应采集血液培养。第3页，共18页，星期日，2025年，2月5日2．采血时机：在患者发热期间越早越好，最好在抗菌治疗前，以发热初期或高峰时为宜。第4页，共18页，星期日，2025年，2月5日3．采血次数及间隔：对怀疑菌血症的成年病人，推荐同时在不同部位采集2-3套（包括一套需氧瓶、一套厌氧瓶或2套需氧瓶）但24小时内一般不超过3次。以后2～5天不必采血。但心内膜炎、真菌血症和导管相关性败血症应多次采集。婴幼儿病人，推荐在不同部位采集2套，可不做厌氧培养。第5页，共18页，星期日，2025年，2月5日4．采血量以培养基的1/10为宜。成人每穿刺点应采血5～10ml。儿童采血量适当减少，婴儿抽血量1～2ml。5．采血方法：

a.皮肤消毒和无菌操作；

b.从肘静脉采血；对于亚急性心内膜炎等病人，应从肘动脉或股动脉采血更适宜；

c.不推荐血入瓶前换针头；第6页，共18页，星期日，2025年，2月5日6。骨髓标本：用骨髓穿刺针从髂骨采集7.脑脊液标本1.严格无菌操作，采集后置于无菌试管中，15min内保温送到实验室，绝不可冷藏。

2.脑脊液标本留取最小量：细菌：≧1ml（但抗酸杆菌≧2ml），真菌：≧2ml第7页，共18页，星期日，2025年，2月5日8.标本拒收标准：血培养瓶破裂或有明显污染培养瓶标识与化验申请单不符用过期的培养瓶采集标本、采血量不足对于不合格标本，及时通知采集人员重新留取标本第8页，共18页，星期日，2025年，2月5日二、标本的接种1、血液标本采集后，立即注入适当的液体增菌培养基内，迅速轻摇，使充分混合，以防止凝固。2、一般细菌用普通肉汤或酚红葡萄糖肉汤，营养要求较高的细菌用肝浸液或胰胨肉汤等。3、如果病人曾服用磺胺类药物，应在每100ml培养基内加对氨苯甲酸5mg。如果病人已用青霉素治疗，应在培养基中加入青霉素酶100U／50ml（青霉素酶不耐热，应在临用时加入）。若病人已用其他抗生素治疗时，可用硫酸镁肉汤增菌。4、接种时应严格注意无菌操作，避免污染杂菌第9页，共18页，星期日，2025年，2月5日三、细菌的培养1、标本的自动化培养血培养瓶置于全自动血培养仪中，阳性仪器报警。涂片革兰染色，镜检，结果想临床医师报告。同时转钟血平板、麦康凯或加做巧克力平板，并进行直接药敏试验。挑取菌落涂片镜检，分别选用GPI或GNI上机进行细菌鉴定和药敏试验。第10页，共18页，星期日，2025年，2月5日2、标本的手工培养标本置35±1℃温箱内孵育，每天取出一次观察有无细菌生长，（注意观察肉汤内有无混浊、沉淀、菌膜、色素、血液变色、指示剂变色等现象）。疑有细菌生长时，挑取培养物涂片行革兰染色镜检。及时转种血平板或其他培养基进行药敏试验或分离培养。根据菌落特征及菌体染色镜检形态，可得出初步印象，并需继续培养，按各种属细菌加以鉴定。报告：“有XXX菌生长第11页，共18页，星期日，2025年，2月5日如不见细菌生长，应继续培养至第7天，取出后接种于血平板，经培养仍无细菌生长时，可报告为：“经7天培养无细菌生长。”对于亚急性心内膜炎病人标本，应培养一个月，才能作出结论。3.特殊菌的培养布鲁菌的培养：将血液标本接种于肝浸液2支，分别置于10％二氧化碳及普通环境中35±1℃培养，每2天观察一次，若有菌生长，作涂片染色镜检，并移种于2份肝浸液平板或血平板，分别置于10％二氧化碳及普通环境下培养。用菌落再作布氏杆菌血清凝集试验，如为阳性，可报告为：“培养出布氏杆菌”。必要时，进一步鉴定及分型。若培养30天后仍无细菌生长者，则可报告：“经X周培养无细菌生长。”第12页，共18页，星期日，2025年，2月5日四、检验程序第13页，共18页，星期日，2025年，2月5日