褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus)IgM的分子特征与表达分析.pdfVIP

第56卷第3期海洋与湖沼Vol.56,No.3

2025年5月OCEANOLOGIAETLIMNOLOGIASINICAMay2025

褐菖鲉(Sebastiscusmarmoratus)IgM的

分子特征与表达分析*

1,21111

何亮银曾智军陈伟鑫陈楠洁周薇

1131①

温靖宇黄淑怡孙赵韩李进寿

（1.宁德师范学院海洋学院福建宁德352100；2.闽东水产品精深加工福建省高等学校工程研究中心福建宁德

352100；3.宁德市以也海洋产业发展有限公司福建宁德352103）

摘要IgM是硬骨鱼类最主要的免疫球蛋白，在鱼体抵抗病原感染中发挥重要作用。为认识褐菖鲉

(Sebastiscusmarmoratus)IgM的分子组成与序列特征，并探究其免疫应答规律，本研究纯化了褐菖鲉

血清IgM蛋白并制备了其鼠源多克隆抗体；克隆了褐菖鲉IgM重链(SmIgMH)基因并对其序列和进化

特性进行了分析；检测了SmIgMH基因mRNA在雌性和雄性鱼体各组织中的分布情况，以及LPS或

PolyI:C刺激后基因的表达变化；对SmIgMH的恒定区进行了原核表达，并检测了重组蛋白与血清

IgM鼠源抗血清的结合。结果显示：利用饱和硫酸铵盐析结合ProteinA亲和层析法纯化获得了高纯

度的IgM蛋白，其由重轻链组成，分子量分别为74kDa和27kDa。血清IgM免疫小鼠制备的多抗效价

达1∶500000，且能特异性识别IgM的重轻链条带。克隆的SmIgMH基因cDNA全长1982bp，包含一

个1746bp的ORF，编码581个氨基酸，对应蛋白质的相对分子质量为65.1kDa，包含信号肽、1个可变

区和4个恒定区结构域。SmIgMH与斜带石斑鱼(Epinepheluscoioides)的IgMH亲缘关系最近，序列

相似度达63.5%。SmIgMH基因mRNA在脾脏、头肾和肾脏组织中表达量最高，且雌性和雄性鱼体中

没有显著差异。LPS或PolyI:C刺激后，脾脏和头肾组织中SmIgMH基因均呈先升高后下降趋势，表

明其能有效应答病原感染。原核表达获得的SmIgMH恒定区重组蛋白大小约66.8kDa，且能被血清

IgM鼠源抗血清特异性识别。研究结果有助于加深对褐菖鲉免疫系统的认识，并为后续免疫检测提供

工具，也为深入研究IgM参与褐菖鲉抗病原感染机制奠定基础。

关键词褐菖鲉;IgM;分子特征;组织分布;表达分析

中图分类号S917.4doi:10.11693/hyhz20241100259

鱼类是脊椎动物中最早出现特异性免疫的类群，2020)。硬骨鱼类Ig主要有IgM、IgD和IgT/IgZ等类

依靠发达的先天性免疫系统和比较完备的适应性免疫型，其中，IgM是发现最早、研究最多的类型，其在硬骨

系统抵御病原感染(Secombesetal,2012;Zhuetal,鱼发育过程中的表达远高于IgD和IgZ(Wangetal,

2013)。免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)在鱼类特异2015)。IgM包含分泌型(secretedimmunoglobulin,

性体液免疫系统中发挥关键作用，能够识别病