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第卷第期南京林业大学学报(自然科学版),
491Vol.49No.1
年月,
20251JournalofNanjingForestryUniversityNaturalSciencesEditionJan.2025
()
松墨天牛GST基因克隆及高温胁迫下的表达特性分析
李子纯,郝德君,李慧,李长燕,许丹雯仪,杨华磊,赵培渊
(南京林业大学林草学院,南方现代林业协同创新中心,江苏南京210037)
摘要:【目的】克隆松墨天牛(Monochamusalternatus)谷胱甘肽S转移酶(glutathioneStransferases,GST)相关基
因,明确GST基因在松墨天牛响应高温胁迫中的效用,为探究亚热带地区松墨天牛的耐热分子机制提供理论依
据。【方法】克隆3条松墨天牛GST基因,结合DNAMAN9.0、ITASSER等软件分析松墨天牛GST基因的结构特
qRTPCR4GST
征;利用技术测定分析松墨天牛成虫和龄幼虫在不同高温、不同处理时长后基因的相对表达
3GST3
量;通过纸盘扩散法验证条松墨天牛基因在保护机体免受氧化应激中的作用。【结果】克隆条松墨天牛
GSTcDNAMaltGSTe1MaltGSTe2MaltGSTt1MaltGSTe1MaltGSTe2GST
基因的序列,分别命名为、和。与均属于
的Epsilon家族,MaltGSTt1属于GST的Theta家族。3条GST基因三维蛋白结构具有指示性结构特征,属于胞质
型GST。松墨天牛4龄幼虫在高温胁迫下MaltGSTe1、MaltGSTe2和MaltGSTt1的相对表达量均出现显著变化,
相对表达水平上调幅度最大;在松墨天牛雄虫体内相对表达量出现明显下调;异源表达
MaltGSTe2MaltGSTt13
条基因蛋白的大肠杆菌表现出较强的抗氧化能力,其中,具有更强的抗氧化能力。【结论】克隆
GSTMaltGSTe2
获得条松墨天牛基因,发现高温胁迫可诱导基因表达量上调;纸盘扩散分析结果表明异源表达
3GSTGSTGST
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