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生物技术通报
·研究报告·BIOTECHNOLOGYBULLETIN2025,41(3):230-239
多星韭AwANSs基因的克隆与表达分析
1,3211314
彭婷林颖谭圆圆饶英黄覃张文娥汪波
52
田瑞丰刘国锋
(1.贵州大学农学院,贵阳550025;2.广州市林业和园林科学研究院,广州510405;3.华中农业大学生命科学技术学院,武汉430070;
4.华中农业大学植物科学技术学院,武汉430070;5.农业农村部人力资源开发中心中国农学会,北京100125)
摘要:【目的】多星韭(Alliumwallichii)是极具特色的高山花卉,花青苷合成酶(ANS)是类黄酮代谢途径下游合成花
青苷的关键酶,研究ANS基因在紫花和白花多星韭花色形成中发挥的作用。【方法】采用pH示差法检测多星韭紫花和白花不同发
育时期总花青苷含量;利用RT-PCR技术克隆紫花和白花AwANS基因,并对其进行表达模式分析。【结果】紫花多星韭花朵总花青
苷含量随花发育逐渐增加,在S4达到峰值,白花花瓣中均检测不到花青苷含量。从紫花中克隆到2条ANS基因序列(AwANSpa和
AwANSpb),CDS长度均为1074bp,编码357个氨基酸;从白花中克隆到5条ANS序列(AwANSwa、AwANSwb、AwANSwc、AwANSwd、
AwANSwe),AwANSwa和AwANSwdCDS长度分别为1074bp和1077bp,分别编码357、358个氨基酸,另外3条序列出现大片段缺失
导致蛋白翻译提前终止。系统进化树分析显示AwANSs与洋葱亲缘关系最近。RT-qPCR分析显示,紫花AwANSs在花瓣中表达量最
高,在根、雌蕊和果实中表达量极低;AwANSs在紫花多星韭的表达随花发育而逐渐升高,在S5达到峰值;而在白花中几乎检测不
到AwANSs表达。【结论】AwANSs的表达具有明显的时空表达特异性,在花瓣中表达量最高。与紫花相比,白花多星韭的花瓣中不
积累花青素,其AwANSs基因在整个花发育过程中也几乎不表达,表明AwANSs基因对多星韭紫色花的形成起着重要作用。
关键词:多星韭;花青苷合成酶;基因克隆;时空表达分析;花青苷
DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2024-1004
CloningandExpressionAnalysisofAwANSGenesinAlliumwallichii
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PENGTingLINYingTANYuan-yuanRAOYingHUANGQin
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