麻天牛源白僵菌菌株生长特性、产孢机制及酶学功能系统性研究.docxVIP

麻天牛源白僵菌菌株生长特性、产孢机制及酶学功能系统性研究

目录

一、内容概括．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1.1麻天牛的危害与防治现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.1.2白僵菌的生物防治潜力．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

1.2国内外研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

1.2.1白僵菌的分类与遗传特性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

1.2.2白僵菌的寄主范围与感染机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

1.3本研究的主要内容与目标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

1.3.1研究内容概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

1.3.2研究目标设定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

二、麻天牛源白僵菌菌株的生长特性研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

2.1菌株的分离与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

2.1.1菌株的分离来源与样品采集．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

2.1.2菌株的形态学与分子生物学鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

2.2菌株的生长条件优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

2.2.1培养基的筛选与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

2.2.2生长温度、pH值等环境因子的测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

2.3菌株的生长代谢特性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

2.3.1菌体生物量积累动态．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

2.3.2营养物质的利用情况分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

2.4菌株的抗氧化能力研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

2.4.1菌株对胁迫环境的适应能力．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45

2.4.2抗氧化相关酶活性的测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47

三、麻天牛源白僵菌菌株的产孢机制研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50

3.1产孢过程的观察与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53

3.1.1产孢结构的形态学观察．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．55

3.1.2产孢过程的动态监测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．56

3.2产孢相关基因的表达分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．58

3.2.1产孢相关基因的克隆与序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．59

3.2.2基因表达量的定量PCR分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．62

3.3产孢调控的分子机制探讨．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．62

3.3.1信号转导通路对产孢的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．66

3.3.2调控因子在产孢过程中的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．68

四、麻天牛源白僵菌菌株的酶学功能研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．73

4.1菌株酶谱分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．77

4.1.1可溶性酶的提取与分离．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．78

4.1.2酶学特性的测定与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．80

4.2主要酶类的生物化学特性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．82

4.2.1蛋白酶的生物化学特性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．83

4.2.2脂肪