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拟南芥AtYbeY蛋白的原核表达与抗体制备工艺
目录
拟南芥AtYbeY蛋白的原核表达与抗体制备工艺（1）．．．．．．．．．．．．．．4
一、文档简述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.1拟南芥AtYbeY蛋白研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
1.2原核表达与抗体制备技术应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
1.3研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
二、拟南芥AtYbeY蛋白概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
2.1AtYbeY蛋白功能及结构特点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
2.2AtYbeY蛋白在拟南芥中的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
三、原核表达系统的选择及构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
3.1原核表达系统的优势．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
3.2表达载体的选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
3.3重组质粒的构建及转化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
四、拟南芥AtYbeY蛋白的原核表达．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
4.1重组蛋白的诱导表达．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27
4.2表达产物的检测与纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
4.3重组蛋白的活性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
五、抗体制备工艺．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
5.1抗原设计与制备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39
5.2免疫动物选择及免疫程序．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41
5.3血清抗体的获取与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43
六、抗体性能评价与检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47
6.1抗体特异性检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48
6.2抗体效价测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49
6.3抗体在相关实验中的应用验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51
七、实验结果的分析与讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52
7.1实验数据分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54
7.2结果讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．60
7.3存在问题及优化建议．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．61
八、结论与展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．66
8.1研究结论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．68
8.2研究创新点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．71
8.3展望与未来研究方向．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．72
拟南芥AtYbeY蛋白的原核表达与抗体制备工艺（2）．．．．．．．．．．．．．76
内容概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．76
1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．77
1.2AtYbeY蛋白概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．79
1.3拟南芥研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．81
AtYbeY蛋白的原核表达系统构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．82
2.1
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