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2025年pcr考试题目及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应中，哪种酶起关键作用？

A.解旋酶

B.DNA聚合酶

C.RNA聚合酶

D.限制酶

答案：B

2.PCR反应的变性温度一般是多少？

A.50-60℃

B.70-80℃

C.90-95℃

D.100-110℃

答案：C

3.以下哪种不是PCR的基本步骤？

A.变性

B.退火

C.延伸

D.转录

答案：D

4.PCR反应中，引物的作用是？

A.提供起始合成的3-OH

B.提供起始合成的5-OH

C.解开双链DNA

D.切割DNA

答案：A

5.在PCR反应中，dNTP的作用是？

A.作为底物

B.作为酶的激活剂

C.作为缓冲剂

D.作为抑制剂

答案：A

6.对于一个20个循环的PCR反应，理论上DNA扩增倍数约为？

A.2^20

B.20^2

C.2×20

D.20/2

答案：A

7.PCR反应体系中，Mg2+的作用是？

A.稳定DNA结构

B.激活DNA聚合酶

C.提高退火温度

D.降低延伸速度

答案：B

8.以下哪个因素对PCR特异性影响最大？

A.引物长度

B.退火温度

C.延伸时间

D.dNTP浓度

答案：B

9.如果PCR产物出现非特异性条带，可能是因为？

A.引物浓度过高

B.模板浓度过低

C.延伸时间过短

D.退火温度过高

答案：A

10.PCR技术最早由谁发明？

A.KaryMullis

B.JamesWatson

C.FrancisCrick

D.RosalindFranklin

答案：A

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应的要素包括哪些？

A.模板DNA

B.引物

C.DNA聚合酶

D.dNTP

E.缓冲液

答案：ABCDE

2.以下哪些情况可能导致PCR失败？

A.模板DNA降解

B.引物设计不合理

C.酶失活

D.反应体系被污染

E.退火温度不合适

答案：ABCDE

3.提高PCR特异性的方法有？

A.优化引物设计

B.提高退火温度

C.降低引物浓度

D.减少循环次数

E.优化模板质量

答案：ABCDE

4.在PCR反应中，缓冲液的作用包括？

A.提供合适的pH环境

B.提供离子环境

C.稳定酶的活性

D.促进引物与模板结合

E.提高dNTP的稳定性

答案：ABC

5.以下哪些是PCR技术的应用？

A.基因克隆

B.疾病诊断

C.法医鉴定

D.基因表达分析

E.遗传疾病筛查

答案：ABCDE

6.关于引物设计，以下说法正确的是？

A.引物长度一般为15-30bp

B.引物的GC含量应在40%-60%

C.引物内部不能有互补序列

D.引物的3端不能有连续的A或T

E.引物之间不能有互补序列

答案：ABCDE

7.PCR产物的检测方法有？

A.琼脂糖凝胶电泳

B.聚丙烯酰胺凝胶电泳

C.荧光定量PCR

D.测序

E.酶切分析

答案：ABCDE

8.以下哪些因素会影响PCR的效率？

A.模板纯度

B.引物纯度

C.酶的活性

D.dNTP浓度

E.反应体积

答案：ABCDE

9.荧光定量PCR与普通PCR相比，其优势在于？

A.能定量分析

B.灵敏度更高

C.特异性更强

D.不需要电泳检测

E.可以实时监测

答案：ABCDE

10.以下哪些是影响PCR退火温度的因素？

A.引物长度

B.引物的GC含量

C.模板的复杂度

D.反应体系的离子浓度

E.酶的种类

答案：ABCD

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR反应中不需要引物。（×）

2.退火温度越高，PCR特异性越高。（×）

3.DNA聚合酶在PCR反应中只能从5到3方向合成DNA。（√）

4.模板DNA的纯度对PCR结果没有影响。（×）

5.引物的3端可以有较多的错配。（×）

6.PCR反应中，延伸时间越长越好。（×）

7.荧光定量PCR只能检测DNA