CD47表达上调介导阿帕替尼(VEGFR2抗体)在食管鳞癌耐药的机制研究.pdfVIP

福建医科大学硕士学位论文

目录

中文摘要1

英文摘要2

前言3

材料与方法5

1实验材料5

2实验方法9

结果18

讨论24

参考文献27

附录29

综述30

致谢39

福建医科大学硕士学位论文

CD47表达上调介导阿帕替尼（VEGFR2抗体）在食管鳞癌耐药的机制

研究

中文摘要

目的：食管鳞癌（Esophagealsquamouscellcarcinoma），发病率高且恶

性程度高，其药物靶向富集能力低，导致治疗效果欠佳。食管鳞癌药物耐药机制

是目前食管鳞癌治疗领域的研究难点和热点。目前，靶向VEGFR的抑制剂（阿帕

替尼）在临床上已成为食管鳞癌主要治疗药物之一，但只有小部分患者能从这抑

制剂中获益，主要原因是其疗效受到多重耐药复发机制的限制。本研究中，我们

旨在研究食管鳞癌细胞CD47表达在阿帕替尼治疗食管鳞癌耐药中的作用，并探索

有效的治疗策略，以提高抗血管生成治疗对食管鳞癌的疗效。

方法：通过食管鳞癌细胞系构建阿帕替尼耐药的肿瘤模型，随后对耐药肿瘤

组织进行RNA测序、qPCR和免疫组化分析，揭示免疫检查点调节因子CD47在阿

帕替尼耐药食管鳞癌中的表达水平；接着，应用细胞增殖CCK8等细胞实验及动物

实验，揭示CD47在阿帕替尼耐药食管鳞癌中具体作用；此外，通过免疫组化检测

CD47调控因子HIF1和NF-κB1在耐药组织的蛋白表达水平；动物治疗实验和免

疫荧光，阐明CD47在阿帕替尼耐药食管鳞癌中表达上调的机制；最后，利用构建

的耐药动物模型和流式细胞分析，阐述阿帕替尼耐药食管鳞癌中免疫微环境的特

点。

结果：在阿帕替尼耐药食管鳞癌中，我们发现阿帕替尼耐药组生存时间显著

低于敏感组；在耐药组织中，在RNA水平和蛋白水平检测到免疫检查点调节因子

CD47表达上调；进一步，我们发现低表达CD47增强阿帕替尼治疗食管鳞癌（ESCC）

的疗效，而高表达CD47抑制阿帕替尼抗肿瘤效应；在阿帕替尼食管鳞癌耐药模型

中，我们发现NF-κB1在蛋白水平表达增高，且与CD47表达在同一肿瘤细胞上；

在蛋白水平，我们发现NF-κB1促进CD47表达上调。此外，在阿帕替尼食管鳞癌

耐药中，我们还发现CD4T细胞肿瘤内浸润减少；耗竭性CD8T细胞、Treg细胞及

髓系细胞在瘤内浸润增加。

结论：在阿帕替尼耐药食管鳞癌中，肿瘤细胞CD47表达上调且遏制阿帕替尼

抗肿瘤效应；机制上，阿帕替尼通过调控NF-κB1介导CD47表达增高；此外，阿

帕替尼耐药重塑了抑制型的肿瘤免疫微环境。

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福建医科大学硕士学位论文

关键词：食管鳞癌，阿帕替尼，肿瘤耐药，CD47，肿瘤免疫环境

英文摘要

Objective:Esophagealsquamouscellcarcinomahasahighincidenceand

malignancy,anditsdrugtargetingenrichmentabilityislow,leadingtopoor

therapeuticeffect.Themechanismofdrugresistanceinesophagealsquamouscell

carcinomaisadifficultandhottopicinthisfield.Vegfr-targetinginhibitors(Apatinib)

areoneofthemaintherapeuticagentsforesophagealsquamouscellcarcinomain

clinicalpractice,butonlyasmallnumb